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文檔簡介
1、目的:
采用自身同種鼠抗原合并百白破疫苗(diphtheria-pertussis and tetanus vaccine,DPT)加強(qiáng)免疫法建立干燥綜合征(Sjogren’s syndrome, SS)動(dòng)物模型,探討中藥麥冬(水煎液)對(duì)模型大鼠腮腺分泌功能的影響,并以模型大鼠腮腺水通道蛋白-1(aquaporin-1, AQP1)的表達(dá)為靶點(diǎn),分析其影響機(jī)制。
方法:
選用健康的雌性10w周齡清潔級(jí)Wis
2、tar大鼠32只,隨機(jī)分為4組,每組8只:空白對(duì)照組、SS模型組、麥冬低、高劑量治療組。模型組和治療組均注射自身同種鼠抗原,分別多點(diǎn)注射于大鼠兩后腳掌與兩側(cè)腹股溝皮下,每只大鼠每次劑量1ml。首次免疫后第28天、42天,用乳化自身抗原加強(qiáng)免疫2次。同時(shí)自身免疫反應(yīng)誘導(dǎo)開始后的第1、14、28、42天每只大鼠背部皮下注射百白破疫苗0.15ml,共4次,以增強(qiáng)免疫反應(yīng)。造模周期為8周。造模成功后,治療組分別給予低、高劑量的麥冬水煎液灌胃,模
3、型組予相同劑量生理鹽水灌胃。空白對(duì)照組給以治療組同等劑量生理鹽水灌胃。觀察大鼠在用藥前后體重、唾液流量、飲水量、腮腺指數(shù)和自身抗體陽性率方面的變化,并用免疫印跡法(Western blotting)分析 SS大鼠腮腺 AQP1的表達(dá),分析麥冬水煎液干預(yù)SS模型大鼠腮腺后的影響。
結(jié)果:
1.經(jīng)過8周的免疫造模,免疫動(dòng)物出現(xiàn)類似 SS的病理改變,存在大量淋巴細(xì)胞浸潤,提示免疫造模成功。
2.治療組大鼠在經(jīng)過麥
4、冬水煎液的治療后,體重增加,唾液流量增加、飲水量減少、腮腺指數(shù)減小,自身抗體陽性率降低。與模型組比較,治療組有顯著性差異(P<0.05)。3.Western blotting檢測顯示實(shí)驗(yàn)各組均出現(xiàn)分子量為42KD的條帶??瞻讓?duì)照組AQP1表達(dá)數(shù)值正常,模型組表達(dá)數(shù)值明顯較少,麥冬高、低劑量組表達(dá)數(shù)值較模型組明顯增強(qiáng)。與空白對(duì)照組比較,模型組 AQP1表達(dá)顯著減少(P<0.05);與模型組比較,麥冬高、低劑量組大鼠腮腺 AQP1表達(dá)顯著增
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