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文檔簡介
1、目的:
探討白介素27(Interleukin27,IL-27)在膿毒癥誘導(dǎo)的心肌功能障礙(sepsis-induced myocardial dysfunction,SIMD)中的作用。
方法:
收集入住重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科的SIMD病人20例(2014.10-2015.3),臨床檢驗中心提供的正常對照組24例。對全部入選的病人及健康志愿者的姓名、住院號、年齡、性別、體溫、脈搏、血壓、呼吸頻
2、率、APACHEⅡ評分、原發(fā)疾病、反映各個臟器功能的生化和檢測指標(biāo)、PCT、PiCCO指標(biāo)和心肌酶譜等進行資料收集。對收集的指標(biāo)進行分析和檢測血漿中 IL-27的表達,并對 IL-27和APACHEⅡ評分做相關(guān)性分析。
野生型雄性C57BL/6J小鼠20只,隨機分為2組:空白對照組(Con組,N=5)、LPS組(LPS組,N=15);基因敲除IL-27受體雄性C57BL/6J小鼠(IL-27R-/-組,N=15)。LPS組及I
3、L-27R-/-組腹腔注射LPS10 mg/kg構(gòu)建小鼠膿毒癥模型,Con組給予相同劑量 PBS。LPS組及 IL-27R-/-組分別于給藥后6、12、24h進行觀察、取材,每個時間點5只小鼠。光鏡及電鏡觀察心肌病理組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)變化;RT-PCR檢測心肌組織IL-27的表達;免疫組化定位IL-27在心肌組織中的表達;ELISA法檢測小鼠血清中 IL-27、cTnI、BNP、IL-6、IL-12、TGF-β及 TNF-α的表達。
4、> 結(jié)果:
1.SIMD患者組與健康對照組相比,除性別沒有顯著差異外,其他指標(biāo)均有顯著性差異,體溫均值雖無差異,但變異度明顯高于正常組。
2.SIMD患者的PiCCO指標(biāo)顯示:患者早期出現(xiàn)心肌收縮力減弱、容量前負荷降低、容量后負荷增加、肺水腫情況加重。SIMD患者的降鈣素原和心肌酶譜表達顯著升高。
3.SIMD患者與健康對照組血清IL-27濃度比較表達增加,且SIMD患者血清IL-27與APACHEⅡ評分
5、之間存在良好的相關(guān)性。
4.小鼠腹腔注射 LPS后出現(xiàn)少動、體溫降低、精神萎靡、眼部膿性分泌物增多、毛發(fā)直立、進食減少、腹瀉等癥狀。
5.光鏡活檢心肌組織證實LPS誘導(dǎo)的心肌組織早期發(fā)生凝固性壞死、核碎裂、消失,胞質(zhì)均質(zhì)紅染或呈不規(guī)則粗顆粒狀、間質(zhì)血管充血、紅細胞外滲、組織水腫及局灶性心肌壞死和中性粒細胞浸潤等。電鏡示小鼠心肌部分肌絲溶解,細胞核腫脹,核周間隙增寬,線粒體排列紊亂、腫脹和空泡化,線粒體嵴部分斷裂甚至溶
6、解。
6.小鼠心肌免疫組化示 IL-27隨時間推移,在心肌細胞表達陽性率增加,陽性信號定位于心肌細胞的細胞質(zhì)。
7.ELISA檢測膿毒癥小鼠血清IL-27表達增加,且在12h表達最高。
8.RT-PCR示膿毒癥小鼠心肌組織IL-27 mRNA表達增加。
9.ELISA檢測心肌損傷標(biāo)志物BNP和cTnI示,與Con組小鼠相比,經(jīng)LPS刺激后的野生型和IL-27R-/-小鼠心肌損傷標(biāo)志物BNP和cTn
7、I都顯著升高,且IL-27R-/-小鼠BNP和cTnI表達都顯著高于野生型小鼠。
10.ELISA檢測炎癥因子TNF-α、TGF-β、IL-6及IL-12的表達示,與Con組小鼠相比,經(jīng)LPS刺激后的野生型和IL-27R-/-小鼠TNF-α、TGF-β、IL-6及IL-12都顯著升高,且IL-27R-/-小鼠TNF-α、TGF-β、IL-6及IL-12表達都顯著高于野生型小鼠。
結(jié)論:
膿毒癥患者機體遭受各
8、種感染時激活機體免疫炎癥系統(tǒng),導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng),其通過多種途徑導(dǎo)致患者心肌功能障礙。SIMD患者基本生命體征、肝、腎功能、感染指標(biāo)及心肌酶譜等較正常健康組表達均異常,提示SIMD病人存在嚴重的炎癥反應(yīng)和明顯的心肌損害。
PiCCO監(jiān)測在評估SIMD的發(fā)生發(fā)展和指導(dǎo)臨床治療具有一定優(yōu)勢,能在早期對SIMD血流動力學(xué)的異常提供診斷依據(jù),PiCCO聯(lián)合心肌損傷標(biāo)志物有助于SIMD的早期診斷。
SIMD病人血清中IL-27表
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