肝衰竭凝血功能障礙與膿毒癥的臨床與基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)相關(guān)研究.pdf

1、肝衰竭的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜,目前公認(rèn)主要包括兩方面:一是各種因素對(duì)肝細(xì)胞的直接損傷,如藥物、病毒等,另一種則為免疫機(jī)制,例如通過(guò)細(xì)胞因子或內(nèi)毒素等介導(dǎo)的免疫損傷。凝血功能障礙是肝衰竭臨床主要特征之一,而因肝衰竭入住ICU的患者往往多合并有膿毒癥,預(yù)后更差。本研究旨在探討肝衰竭合并膿毒癥中凝血因子的水平變化及炎癥因子在其中的作用。實(shí)驗(yàn)主要由以下幾部分構(gòu)成:
　　第一部分，肝衰竭凝血功能障礙與膿毒癥的臨床相關(guān)性研究
　　目的:肝衰

2、竭與膿毒癥患者凝血功能的臨床檢測(cè)及預(yù)后判斷
　　方法:1常規(guī)檢測(cè)肝衰竭合并膿毒癥患者的血漿纖維蛋白原FIB(I因子)、凝血因子II(II因子)、凝血因子VII(VII因子)、凝血因子V(V因子)、鈣離子(IV因子)、抗凝血酶III(AT3)、血小板(PLT)、平均血小板體積(MPV)、D-二聚體、凝血酶原時(shí)間(PTA)、和纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)水平,并與肝衰竭組、肝硬化組進(jìn)行比較。2對(duì)30例肝衰竭合并膿毒癥組進(jìn)行血栓彈力圖的檢

3、測(cè),并與30例肝衰竭組、30例肝硬化組進(jìn)行比較。3對(duì)肝衰竭合并膿毒癥患者進(jìn)行單因素及多因素logistic回歸分析并建立回歸方程。
　　結(jié)果:1肝衰竭合并膿毒癥患者FIB(1.12±0.56g/L)、II因子(15.77±9.82％)、VII因子(12.29±11.47%)、V因子(19.48±17.64%)、AT3(14.41±8.31%)、PLT(34.41±22.07X109)、MPV(10.65±1.11fL)、D二聚體(

4、13.64±5.54mg/L)、和FDP(23.40±16.89ug/ml)水平與對(duì)照組相比較,差異均有顯著性(P<0.05)。2肝衰竭合并膿毒癥患者的血栓彈力圖參數(shù)中,K值(7.44±2.49)、R值(19.10±2.73)、angle(25.61±9.42)、MA(19.71±6.61)、CI(9.80±3.33)水平與對(duì)照組相比較,差異均有顯著性(P<0.05)。3獲得的Logistic回歸預(yù)測(cè)模型為:p=1/(1+e(-0.12

5、8*X1-0.058*X2+0.211*X3+0.2*X4+0.25)),此回歸方程判斷預(yù)后好壞的特異度,靈敏度和準(zhǔn)確度分別為92%、93.9%、92.8%。在這11個(gè)因素中,VII因子(OR=0.88,95%CI:0.787~0.985)、PLT(OR=0.944,95%CI:0.907~0.982)、FDP(OR=1.235,95%CI:1.052~1.451)、D二聚體(OR=1.235,95%CI:1.076~1.388)4個(gè)因

6、素進(jìn)入回歸方程。
　　結(jié)論:當(dāng)肝衰竭伴隨有膿毒癥時(shí),其凝血障礙加劇。在總計(jì)11個(gè)凝血障礙相關(guān)因素中,VII因子、PLT、FDP、D二聚體這4個(gè)因素可能是影響慢加急性肝衰竭合并膿毒癥預(yù)后的獨(dú)立因素。
　　第二部分，肝衰竭凝血功能障礙與膿毒癥時(shí)炎癥因子IL-4、IL-6、IL10、IL-17表達(dá)水平的研究
　　目的:檢測(cè)炎癥因子IL-4、IL-6、IL10、IL-17在肝衰竭凝血功能障礙與膿毒癥中的水平。
　　方法:

7、ELISA方法檢測(cè)30例肝衰竭合并膿毒癥患者炎癥因子IL-4,IL-6,IL10和IL-17表達(dá)水平,并與30例肝衰竭患者、30例肝硬化患者之間的比較。
　　結(jié)果:肝衰竭合并膿毒癥患者炎癥因子IL-6(61.64±14.38pg/ml)、IL-10(49.43±8.15pg/ml)、IL-17(685.27±122.91pg/ml)與對(duì)照組比較有顯著差異(P<0.05),IL-4(21.54±5.59pg/ml)無(wú)明顯差異(P>0

8、.05)。
　　結(jié)論:當(dāng)肝衰竭合并有膿毒癥時(shí),IL-6、IL-10、IL-17表達(dá)水平明顯升高。
　　第三部分，阻斷IL-6可能提高小鼠膿毒癥易感性的初步研究
　　目的:建立IBD小鼠,驗(yàn)證IL-6在炎癥時(shí)發(fā)揮的作用,并且探尋IL-6的作用機(jī)制。
　　方法:通過(guò)枸櫞酸桿菌灌胃法,建立IBD小鼠模型;以滅活的枸櫞酸桿菌灌胃作為對(duì)照,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)IBD小鼠及對(duì)照組之間小腸派氏結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)中Th17細(xì)胞的含量

9、;對(duì)IBD小鼠進(jìn)行靜脈注射IL-6的中和抗體,以注射IgG抗體作為對(duì)照,進(jìn)行Th17細(xì)胞的檢測(cè)及計(jì)算建模成功率。
　　結(jié)果:需選擇5周齡小鼠適合建立IBD小鼠模型;在小腸派氏結(jié)中產(chǎn)生的CD4+T細(xì)胞中IL-17A+Th細(xì)胞比例明顯增加;IL-6中和抗體處理的IBD小鼠降低了IL-17A+Th細(xì)胞的比例,提高了IBD小鼠建模成功率。
　　結(jié)論:Th17細(xì)胞的分化和活化需要IL-6的誘導(dǎo)。通過(guò)Th-17的途徑,IL-6水平的下降