大鼠門靜脈結(jié)扎后肝組織再生過程中自噬現(xiàn)象的變化及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一,肝切除術是治療肝癌的最有效手段。但術后剩余肝臟體積(future liver remnant,F(xiàn)LR)不足是造成術后肝衰竭等嚴重并發(fā)癥的重要因素。研究發(fā)現(xiàn)當正常肝臟術后剩余肝臟體積(future liver remnant,F(xiàn)LR)/總肝體積(total liver volume,TLV)<20%、輕度病理肝臟FLR/TLV<30%、代償性肝硬化FLR/TLV<40%術后出現(xiàn)肝功能衰竭的風險很大。如何

2、有效增加肝切除術后剩余肝臟體積(FLR)及儲備功能,提高肝臟腫瘤手術的安全性,一直是肝臟外科致力解決的問題。目前臨床上常用的方法是在肝切除前實施擬切除側(cè)肝臟的門靜脈栓塞(portal vein embolization,PVE),它是通過選擇性栓塞門靜脈分支,更改門靜脈血流,使肝臟血流動力學改變導致非栓塞側(cè)門靜脈血流增加,術后栓塞側(cè)肝臟萎縮、非栓塞側(cè)肝臟代償性增生,但其具體機制尚不清楚。本研究旨在探討細胞自噬(Autophagy)在大鼠

3、門靜脈結(jié)扎后肝組織再生過程中表達的改變及意義。
  方法:60只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分成假手術組和門靜脈結(jié)扎組。通過手術結(jié)扎大鼠肝門靜脈頭支的方法來建立肝再生模型,分別于術后12h、24h、48h、72h、168h處死大鼠,取非結(jié)扎側(cè)肝臟組織標本。采用蛋白印跡(Western blot)技術檢測非結(jié)扎側(cè)肝組織中Beclin1和LC3的表達,同時采用免疫組化(IHC)檢測非結(jié)扎側(cè)肝組織中細胞周期蛋白D1(

4、Cyclin D1)的表達,所有實驗結(jié)果采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。
  結(jié)果:1.大鼠70%門靜脈結(jié)扎后,結(jié)扎側(cè)肝葉呈進行性萎縮,非結(jié)扎側(cè)肝葉逐漸肥大再生。門靜脈結(jié)扎組非結(jié)扎側(cè)肝葉占全肝重量百分比與假手術組比較術后12h顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),并且隨著術后時間延長,這種差異越來越明顯。
  2.大鼠70%門靜脈結(jié)扎后非結(jié)扎側(cè)肝組織中Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ的表達和Cyclin D1表達

5、與假手術組比較術后顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。其中Beclin1于術后12h開始升高,24h達高峰,隨后24h-168h緩慢下降,168h與對照組無明顯差異;LC3Ⅱ/Ⅰ于術后12h開始升高,24h達高峰,48h-168h緩慢下降,168h與對照組無明顯差異;Cyclin D1于術后12h開始升高,24h達高峰,而72h又增強,72h-168h緩慢下降,但仍高于對照組。
  3.Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ的表達和

6、Cyclin D1表達與門靜脈結(jié)扎后非結(jié)扎側(cè)肝再生密切相關,門靜脈結(jié)扎后Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ表達與Cyclin D1表達呈正相關,基本與Cyclin D1同步表達。
  結(jié)論:大鼠70%門靜脈結(jié)扎后結(jié)扎側(cè)肝臟萎縮而非結(jié)扎側(cè)肝臟再生肥大。再生肝組織中自噬水平明顯升高,并且Cyclin D1表達也明顯升高。自噬可能通過維持肝細胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài),保證了肝再生的原料和能量供應;并且自噬通過調(diào)控G1/S期轉(zhuǎn)換關鍵性細胞周期蛋白Cycli

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