氯沙坦對90%門靜脈結(jié)扎大鼠肝再生的影響.pdf

1、研究背景及目的：目前,廣泛肝切除術(shù)是治療肝臟巨大腫瘤,肝門膽管癌及大腸癌肝轉(zhuǎn)移的首選方法,但術(shù)后殘留肝體積過小導(dǎo)致的致命性肝衰竭限制了其在臨床上的應(yīng)用。為提高手術(shù)的安全性,有學(xué)者應(yīng)用門靜脈栓塞(PVE)作為廣泛肝切除的術(shù)前準備,并取得良好效果。PVE可使預(yù)保留肝組織(FLR)代償性增生,提高了手術(shù)的安全性,使更多患者獲得手術(shù)治療的機會。但即使接受術(shù)前PVE,仍然有5％-36%的患者未能行廣泛肝切除術(shù),其主要原因是PVE后FLR增生不足。

2、
　　 肝再生是一個由多因子參與、多階段的、精確有序的過程。在動物模型中發(fā)現(xiàn)多種細胞因子和生長因子對肝再生起著重要作用,且這些因子在人肝再生過程中也有表達。其中肝細胞生長因子(HGF)是目前已知的對成熟肝細胞作用最強的增殖刺激因子和促有絲分裂原,在各種肝再生動物模型中升高動物血清HGF水平將促進肝再生。研究表明,血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是HGF的強抑制劑,在糖尿病及肺纖維化動物模型中應(yīng)用AngⅡ受體1(AT1)拮抗劑可提高動物血

3、清HGF水平,減輕心血管及肺臟病變。但AT1拮抗劑對大鼠門靜脈結(jié)扎(PBL)后血清HGF水平及肝再生作用的研究尚未見報道。
　　 廣泛肝切除術(shù)后發(fā)生急性肝衰竭的另外一個重要原因是門靜脈壓力急劇升高。由于大量肝組織被切除,供應(yīng)殘余肝組織的門靜脈血流急劇增加,破壞肝竇結(jié)構(gòu),導(dǎo)致肝損傷。同樣,在術(shù)前門靜脈栓塞(PVE)中,門靜脈壓力的升高勢必破壞該側(cè)肝組織結(jié)構(gòu),使肝再生受損,而降低過高的門靜脈壓力將減輕肝損傷,間接促進肝再生。

4、　　 研究表明,氯沙坦作為一種AngⅡ受體拮抗劑,可明顯降低肝硬化門脈高壓患者的門靜脈壓力,減輕患者的臨床癥狀。但氯沙坦對門靜脈結(jié)扎或栓塞后早期門靜脈壓力及肝再生作用的研究未見報道,因此,本研究采用90%大鼠PBL模型,探討氯沙坦對PBL大鼠門靜脈壓力,血清HGF水平及肝再生的影響。
　　 方法：采用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,90%PBL按本課題前期方法進行,實驗方法如下:

5、>　　 將144只SD大鼠分為假手術(shù)組、單純PBL組(模型組)和PBL+2mg/kg.d氯沙坦干預(yù)組(治療組),分別于術(shù)后0h、6h、12h、24h、48h、72h、120h、168h測門靜脈壓力,心臟取血檢測血清ALT、AST水平;酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清HGF水平;取大鼠肝臟并計算未結(jié)扎側(cè)肝重占總肝重比例,HE染色觀察未結(jié)扎側(cè)肝組織的病理學(xué)變化;免疫組化檢測未結(jié)扎側(cè)肝組織的增殖細胞核抗原(PCNA)表達,計算PCNA

6、標(biāo)記率。
　　 結(jié)果：①PBL術(shù)后模型組大鼠門靜脈壓力迅速升高,12h達到峰值,隨后逐漸下降,在術(shù)后6h-72h明顯高于假手術(shù)組(P＜0.01)。與模型組相比,治療組大鼠門靜脈壓力在術(shù)后6h-48h降低明顯(P＜0.05或P＜0.01);②PBL術(shù)后大鼠血清ALT及AST水平迅速升高。與假手術(shù)組相比,模型組ALT水平在術(shù)后12h-72h明顯升高(P＜0.01),而AST值在術(shù)后12h-72h明顯高于假手術(shù)組(P＜0.01)。與模

7、型組相比,治療組ALT值在術(shù)后12h-48h明顯降低(P＜0.01或＜0.05),而AST值則在12h-72h明顯降低(P＜0.01或＜0.05);③PBL術(shù)后模型組及治療組大鼠血清HGF水平明顯升高,并在觀察時間內(nèi)維持在較高水平,治療組大鼠血清HGF水平在術(shù)后6h-168h明顯高于模型組(P＜0.01);④PBL術(shù)后,結(jié)扎側(cè)肝組織呈漸萎縮,未結(jié)扎側(cè)肝組織則代償性增生,其所占總肝重比例不斷升高。從術(shù)后12h開始,模型組大鼠未結(jié)扎側(cè)肝組織

8、所占百分比明顯高于假手術(shù)組,并隨時間的推移逐漸增加。治療組未結(jié)扎側(cè)肝組織占總肝重比例在術(shù)后24h-168h明顯高于模型組(P＜0.01);⑤PBL術(shù)后模型組大鼠未結(jié)扎側(cè)肝組織出現(xiàn)細胞水腫,肝竇明顯擴張,術(shù)后72h可見組織細胞水腫及肝小葉結(jié)構(gòu)破壞嚴重,但隨后肝組織結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)正常。治療組術(shù)后24h可見細胞水腫及肝竇擴張,程度較模型輕,肝竇結(jié)構(gòu)破壞不明顯。兩實驗組從術(shù)后24h開始均可見核分裂相;⑥大鼠肝組織PCNA標(biāo)記率的基礎(chǔ)值為5.55%

9、,模型組大鼠肝組織PCNA陽性率在術(shù)后明顯升高,并于術(shù)后120h達到峰值,隨后緩慢下降,在術(shù)后6h-168h明顯高于假手術(shù)組(P＜0.01)。與模型組組相比,治療組大鼠肝組織PCNA標(biāo)記率在術(shù)后12h-72h明顯升高(P＜0.01或＜0.05)。
　　 結(jié)論:①在大鼠90%PBL的模型中,結(jié)扎側(cè)肝組織逐漸萎縮,而未結(jié)扎側(cè)肝組織代償性增生肥大,是一個可用以研究術(shù)前PVE的肝再生模型。
　　 ②氯沙坦可明顯促進90%PBL后