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1、量子點(diǎn)(quantum dots, QDs),又稱為半導(dǎo)體納米晶體(semiconductor nanocrystals,NCs),作為一類(lèi)新型生化探針和傳感器,近年來(lái)受到了人們的廣泛關(guān)注。與傳統(tǒng)有機(jī)染料相比,量子點(diǎn)具有許多獨(dú)特的光學(xué)性質(zhì),例如激發(fā)光譜寬而連續(xù)、發(fā)射光譜窄而對(duì)稱、抗光漂白能力強(qiáng)、穩(wěn)定性好等。目前,量子點(diǎn)的應(yīng)用主要集中于離子和分子的分析檢測(cè)、細(xì)胞標(biāo)記與成像、免疫分析以及臨床分析和診斷等方面。
用作熒光標(biāo)記物的量子
2、點(diǎn)必須是水溶性的。傳統(tǒng)金屬有機(jī)相法制備的量子點(diǎn)雖然量子產(chǎn)率較高,但水溶性和生物相容性較差,需要進(jìn)一步進(jìn)行表面改性。量子點(diǎn)也可以由成本低、重復(fù)性好的水相法制備,但得到的量子點(diǎn)存在量子產(chǎn)率低、熒光光譜寬等缺點(diǎn)。因此,合成出高質(zhì)量的量子點(diǎn)是使其在生物、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的前提,具有十分重要的意義?;谝陨媳尘埃卷?xiàng)研究進(jìn)行的具體工作如下:
首先采用水熱法,在谷胱甘肽和巰基乙酸的共同修飾下合成了生物相容性好、熒光強(qiáng)度高的CdTe量子點(diǎn)
3、。考察了反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度、pH值、配體濃度及配體比例對(duì)合成量子點(diǎn)的影響。對(duì)合成的量子點(diǎn)進(jìn)行了熒光光譜、紫外可見(jiàn)吸收光譜、TEM、XRD和紅外光譜表征。將GSH-TGA共修飾的量子點(diǎn)與單獨(dú)使用GSH或TGA修飾的量子點(diǎn)進(jìn)行比較,GSH-TGA-QDs的熒光強(qiáng)度最高,發(fā)光范圍最寬,光穩(wěn)定性明顯優(yōu)于GSH-QDs。
然后,以GSH-TGA共修飾的CdTe量子點(diǎn)作為熒光探針,基于熒光猝滅作用對(duì)痕量Cu2+進(jìn)行了定量檢測(cè)。條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
4、表明當(dāng)Cu2+濃度在0.015~2.7μmol·L-1范圍內(nèi)時(shí),CdTe量子點(diǎn)熒光猝滅程度的對(duì)數(shù)與Cu2+濃度呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系,線性回歸方程為ln(I0/I)=0.754c+0.0596,線性相關(guān)系數(shù)為0.9994;方法的檢出限為0.6 mg·kg-1;對(duì)濃度為0.5μmol·L-1的銅標(biāo)準(zhǔn)溶液平行測(cè)定11次,得到的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.0%;方法的檢出限為0.6 mg·kg-1。將本方法用于大米樣品中Cu2+的測(cè)定,與電熱原子吸收法的
5、測(cè)定結(jié)果一致,t檢驗(yàn)和F檢驗(yàn)結(jié)果表明這兩種測(cè)定方法無(wú)顯著性差異。
最后,利用量子點(diǎn)表面的羧基與抗體分子的氨基之間的相互作用,使CdTe量子點(diǎn)與鼠抗人大腸癌單克隆抗體ND-1結(jié)合,通過(guò)抗體與抗原之間的特異性免疫反應(yīng),實(shí)現(xiàn)了CdTe量子點(diǎn)對(duì)大腸癌細(xì)胞CCL187的免疫標(biāo)記。同時(shí)用未鏈接抗體的量子點(diǎn)作為對(duì)照,結(jié)果表明QDs-ND-1復(fù)合熒光探針對(duì)大腸癌細(xì)胞的標(biāo)記是特異性的。由于實(shí)驗(yàn)中制備的CdTe量子點(diǎn)表面包覆著GSH和TGA兩種修
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