鹽芥Th TRXh功能分析和鹽芥不同生態(tài)型的比較蛋白質組學初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、山東師范大學碩士學位論文鹽芥ThTRXh功能分析和鹽芥不同生態(tài)型的比較蛋白質組學初步研究姓名:孫志賓申請學位級別:碩士專業(yè):發(fā)育生物學指導教師:趙彥修20060420山東師范大學碩士學位論文鹽芥肪7嬲功能分析和鹽芥不同生態(tài)型的比較蛋白質組學初步研究孫志賓(山東師范大學生命科學學院,濟南,250014)摘要植物在其生活史中要受到各種脅迫的影響,如干旱、溫度、臭氧和紫外線照射、高鹽和病毒侵染等,這些脅迫的發(fā)生常會伴隨ROS的產生和次生性氧化

2、脅迫的發(fā)生。生物體可通過多種調節(jié)途徑和調節(jié)方式對生物體的氧化還原狀態(tài)進行調節(jié),與硫氧還蛋白相關的氧化還原調節(jié)是這些調節(jié)方式中的一種。本論文實驗的第一部分研究了鹽芥硫氧還蛋白基因砌豫鼢的表達模式,砌黝的原核表達,GST融合蛋白的純化和活性測定,在擬南芥中過量表達砌豫砌對擬南芥脅迫耐受性的影響,構建了鹽芥勱豫腸基因的沉默表達載體并轉化鹽芥獲得了轉基因株系。鹽芥砌zR砌受各種脅迫誘導表達,在體外表達該蛋白具有tr)【活性。對過量表達鹽芥砌豫勱

3、基因的擬南芥脅迫耐受性分析發(fā)現(xiàn),轉基因株系在萌發(fā)階段無論是在甲基紫精還是在NaCl上的萌發(fā)速率都快于野生型,但早期生長狀況都不如野生型;在兩種脅迫處理條件下轉基因和野生型根的生長都受抑制,但轉基因株系的主根受抑制程度低,側根分化受抑制明顯。鹽芥砌丁兄砌基因沉默株系已得到,在正常的生長條件下其表型與野生型鹽芥的表型沒有明顯差別。在今后,還有待于進行一系列生理生化分析來輔證鹽芥勱豫姍基因的功能。蛋白質組學可以研究許多基因組學無法研究的層面,

4、如:蛋白質的表達水平、氨基酸序列、翻譯后加工及定位和蛋白質的相互作用等,利用蛋白質組學研究方法已經對許多植物如擬南芥、水稻和玉米等進行了研究,而鹽芥蛋白質組學的研究還未見報道。鹽芥已成為研究植物耐鹽性的模式材料,已經有大量的EsT數(shù)據(jù)可用,鹽芥與擬南芥的近緣性又使得可以用擬南芥的基因組信息及蛋白質數(shù)據(jù)庫來對鹽芥進行檢索。本實驗論文的第二部分建立了一個雙向凝膠電泳結合蛋白質組工作站研究蛋白質表達差異的平臺,優(yōu)化了鹽芥蛋白提取的方法及等電聚

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