蚯蚓超氧化物歧化酶理化性質(zhì)及其提取條件的研究.pdf

1、本文以大平二號(hào)蚯蚓為原料，對(duì)其體內(nèi)超氧化物歧化酶的理化性質(zhì)以及提取條件進(jìn)行了研究，得出以下幾點(diǎn)結(jié)論： 1．蚯蚓在自然清水中排出體內(nèi)泥砂需要24h左右，而采用5％硫酸鈉和9％硫酸鎂處理可使蚯蚓排砂時(shí)間分別縮短到18min和30min，提高SOD活性分別為27.2％和27％。 2．在蚯蚓SOD提取過(guò)程中外加銅、鋅離子可使酶活性提高。單獨(dú)加銅離子時(shí)最適濃度為0.5mmol·L<'-1>，可以提高蚯蚓SOD活性17.0％；單獨(dú)加

2、鋅離子處理時(shí)最適濃度為0.04mmol·L<'-1>，提高蚯蚓SOD活性為16.0％；以0.04mmol·L<'-1>鋅離子濃度和0.33mmol·L<'-1>銅離子濃度配合，為提高蚯蚓SOD活性的最佳濃度配比，能提高蚯蚓SOD活性19.6％。銅、鋅離子處理的SOD同工酶譜分析表明：銅、鋅離子處理只提高各同工酶的活性，不影響其帶數(shù)。 3．溫度、pH、提取液體積對(duì)蚯蚓SOD活性均有一定的影響。蚯蚓SOD是一種熱穩(wěn)定性很高的酶，35

3、～40℃表現(xiàn)出最高活性，50℃后酶活性降低到最高活性的62.2％；同工酶分析表明50℃后使SOD部分同工酶失活。SOD對(duì)pH值變化也是比較穩(wěn)定的酶類(lèi)，蚯蚓SOD的最適pH值為7.8～8.2；SOD同工酶分析表明：pH主要影響SOD同工酶的活性，只在pH9.0時(shí)有部分同工酶帶的丟失。提取蚯蚓SOD的最適提取液體積為蚯蚓鮮重的4倍(ml／g)。 4．通過(guò)不同硫酸銨飽和度沉淀蚯蚓SOD研究發(fā)現(xiàn)：蚯蚓SOD活性主要集中在60～90％硫酸

4、銨飽和度范圍內(nèi)；這段范圍沉淀出的SOD粗產(chǎn)品比活為229.6(U／mg)，產(chǎn)率為55.1％。 5．通過(guò)不同濃度丙酮對(duì)蚯蚓SOD沉淀研究發(fā)現(xiàn)：蚯蚓SOD活性主要集中在丙酮濃度0.7～1.2V范圍內(nèi)，這段丙酮濃度范圍提取出的SOD粗產(chǎn)品比酶活為132.1(U／mg)，產(chǎn)率為64.9％，其SOD同工酶分析表明：丙酮沉淀所得產(chǎn)品中含有蚯蚓原液同工酶6條中的5條。 6．對(duì)丙酮和硫酸銨沉淀分離的蚯蚓SOD產(chǎn)品進(jìn)行。POD同工酶分析表