鹽酸甜菜堿對腦缺血再灌注損傷大鼠的防治作用及其機制.pdf

1、目的：
　　研究鹽酸甜菜堿（BTH）對腦缺血再灌注損傷大鼠的防治作用，初步探討其作用機制。
　　方法：
　　SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、鹽酸甜菜堿低、高劑量組（10和20mg/kg）及依達拉奉組（3mg/kg）；對經(jīng)典線栓法適當改進后進行大鼠左側(cè)大腦中動脈栓塞（MCAO）模型的制備，假手術(shù)組只對其進行肌肉分離術(shù)，不插入栓線，其余操作相同。各組在手術(shù)前3天（1次/天），手術(shù)后即刻及手術(shù)后1h分5次分別腹腔注射鹽酸甜

2、菜堿（10和20mg/kg）或依達拉奉（3mg/kg）及等容量生理鹽水。缺血1h，再灌注48h；
　　每組隨機取3只大鼠用激光多普勒分別測定術(shù)前、術(shù)后即刻大鼠左側(cè)腦血流量變化；在腦缺血1h再灌注48h后每組隨機取6只大鼠進行神經(jīng)行為學評分；每組隨機取3只大鼠腦組織進行TTC染色，測定腦梗死面積；另每組隨機取6只大鼠用4％多聚甲醛固定，（1）每組隨機取3只大鼠腦組織行HE染色，觀察缺血側(cè)腦組織的病理變化，（2）剩余每組3只用透射電子

3、顯微鏡（TEM）觀察缺血側(cè)皮層區(qū)的超微結(jié)構(gòu)變化；制備大鼠缺血側(cè)腦皮層勻漿取上清液，分光光度法測缺血側(cè)腦皮層勻漿液超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量；酶聯(lián)免疫吸附測定法測缺血側(cè)腦組織同型半胱氨酸含量（Hcy）及基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）含量；Western blot方法檢測大鼠缺血側(cè)海馬基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關(guān)蛋白CHOP、EIF2α、p-EIF2α、XBP-1、GRP78等的表達。
　　結(jié)

4、果：
　　1、鹽酸甜菜堿對大鼠神經(jīng)功能的保護作用
　　與模型組比較，不同劑量BTH治療后可明顯降低腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)行為學評分（P<0.01），且不同劑量BTH治療組的腦梗死面積均明顯減小（P<0.01）；表明鹽酸甜菜堿對腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能起到了保護作用。HE染色結(jié)果和TEM結(jié)果均表明，模型組大鼠腦組織的病理狀態(tài)明顯得到改善，具有明顯保護受損腦組織的作用。
　　2、鹽酸甜菜堿對Hcy含量的影響
　　

5、與假手術(shù)組比較，模型組大鼠腦組織Hcy含量明顯升高，不同劑量BTH治療組大鼠Hcy含量與模型組相比明顯降低（P<0.05，P<0.01）。
　　3、鹽酸甜菜堿抗氧化作用
　　與假手術(shù)組比較，模型組大鼠腦皮層勻漿液SOD活性降低，MDA含量升高，而不同劑量BTH治療組大鼠與模型組比較，SOD活性升高，MDA含量降低（P<0.05，P<0.01）。
　　4、鹽酸甜菜堿對MMP-9含量的影響
　　與假手術(shù)組比較，模型組

6、大鼠腦組織MMP-9含量明顯升高，而不同劑量BTH治療組大鼠MMP-9含量與模型組比較均明顯降低（P<0.01）。
　　5、鹽酸甜菜堿對大鼠海馬MMP-9蛋白表達水平及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關(guān)蛋白CHOP、p-EIF2α/EIF2α、XBP-1、GRP78等蛋白表達的影響
　　與假手術(shù)組比較，模型組和不同劑量BTH組大鼠海馬MMP-9的蛋白表達量增多，與模型組比較，不同劑量BTH組MMP-9蛋白表達降低（P<0.01）。
　　與

7、假手術(shù)組比較，模型組和不同劑量BTH組大鼠海馬CHOP、p-EIF2α/EIF2α、XBP-1、GRP78的蛋白表達量均增多，與模型組比較，不同劑量BTH組CHOP、p-EIF2α/EIF2α、XBP-1蛋白表達均有不同程度降低（P<0.05，P<0.01），GRP78的蛋白表達量則增多（P<0.05，P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、鹽酸甜菜堿可降低腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能行為學評分，增加腦血流量，減小缺血區(qū)腦梗

8、死面積，對缺血側(cè)大腦皮質(zhì)和海馬神經(jīng)細胞具有保護作用，表明鹽酸甜菜堿對腦缺血再灌注損傷大鼠的缺血區(qū)腦組織具有保護作用。
　　2、鹽酸甜菜堿可降低腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織Hcy含量，提示降低Hcy水平可能是鹽酸甜菜堿改善腦缺血再灌注損傷的重要機制。
　　3、鹽酸甜菜堿可使腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織SOD活性升高，MDA含量降低，表明抗氧化應激可能是鹽酸甜菜堿改善腦缺血再灌注損傷的機制之一。
　　4、鹽酸甜菜堿可減少腦缺血