EGCG通過調(diào)控MDSCs介導(dǎo)免疫抑制阻滯腫瘤免疫逃逸研究.pdf

1、體內(nèi)外研究表明，EGCG對前列腺癌、乳腺癌、肺癌等諸多腫瘤具有一定的防治作用。然而，EGCG的低生物利用度使其在體內(nèi)難以達(dá)到抗腫瘤的有效濃度，導(dǎo)致其抗腫瘤機理至今尚未明確。
　　腫瘤與免疫息息相關(guān)。腫瘤免疫逃逸，即腫瘤能夠通過某些途徑使宿主機體不能產(chǎn)生有效抗腫瘤的免疫應(yīng)答，其作用機制相當(dāng)復(fù)雜。其中以髓系抑制性細(xì)胞（Myeloid-Derived Suppressor Cells，MDSCs）為主的負(fù)向調(diào)節(jié)抗腫瘤免疫應(yīng)答的免疫抑制性

2、細(xì)胞亞群被認(rèn)為是腫瘤免疫逃逸的重要原因之一。然而，EGCG是否能通過調(diào)控MDSCs這一免疫學(xué)途徑發(fā)揮抗腫瘤作用的研究卻鮮有報道。
　　在本論文中，通過建立高轉(zhuǎn)移性癌癥經(jīng)典模型（4T1小鼠乳腺癌），評價EGCG在體內(nèi)外乳腺癌生長的抑制作用;考察EGCG對乳腺癌小鼠體內(nèi)CD11b+Gr-1+MDSC、CD4+T和CD8+T及Treg、Arg-1和iNOS的影響;并在此基礎(chǔ)上，利用磁珠從小鼠脾臟中分選出高純度乳腺癌誘導(dǎo)的MDSCs，進(jìn)一

3、步研究EGCG對MDSCs生長、凋亡及其介導(dǎo)免疫抑制的關(guān)鍵效應(yīng)分子的影響。實驗結(jié)果如下:
　　1.在4T1體外實驗中，EGCG能顯著改變4T1細(xì)胞形態(tài)，并呈濃度依賴性地抑制4T1細(xì)胞增殖，EGCG純度越高其對4T1細(xì)胞抑制能力越強，在濃度范圍內(nèi)（50μg/ml-250μg/ml），EGCG能顯著抑制4T1乳腺癌細(xì)胞的侵襲和遷徙，并呈濃度依賴性地誘導(dǎo)4T1細(xì)胞凋亡。然而，EGCG對4T1細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡能力并不強，當(dāng)EGCG濃度為25

4、0μg/ml時，其誘導(dǎo)4T1細(xì)胞的凋亡率僅有12.5％。
　　2.在乳腺癌小鼠模型中，EGCG能顯著抑制乳腺癌小鼠腫瘤的生長和脾臟的腫大，能呈劑量依賴效應(yīng)地降低荷瘤小鼠體內(nèi)各部位的CD11b+Gr-1+MDSCs含量，能夠緩解荷瘤小鼠體內(nèi)的免疫抑制狀態(tài)。同時，EGCG能通過顯著降低了Treg、Arg-1和iNOS的表達(dá)，提升荷瘤小鼠體內(nèi)CD4+T和CD8+T來抑制腫瘤的免疫逃逸。
　　3.在MDSCs的體外實驗中，EGCG能

5、通過誘導(dǎo)凋亡和阻滯分裂周期直接作用與MDSCs，降低其免疫抑制能力;并且EGCG下調(diào)Arg-1、iNOS、gp91和p47的表達(dá)，減少精氨酸酶和ROS的含量，促進(jìn)T細(xì)胞的活化和增殖，降低T細(xì)胞凋亡;同時EGCG抑制GM-CSF、IL-6、IL-13的表達(dá)，從而阻滯MDSCs的活化;此外，EGCG能夠通過抑制TGF-β、IL-10表達(dá)，降低MDSCs對Treg細(xì)胞的招募，并抑制巨噬細(xì)胞M2轉(zhuǎn)化，提高T細(xì)胞活性。
　　4.通過比較發(fā)現(xiàn)