2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩67頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:
  肌萎縮側(cè)索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一種罕見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,表現(xiàn)為肌無力、肌萎縮,伴構(gòu)音障礙、吞咽困難等,最終呼吸衰竭,目前缺乏特效治療方法。本研究擬采用hSOD1-G93A轉(zhuǎn)基因小鼠,給予不同濃度健脾益肺方灌胃處理,并通過評估其體重變化、運動功能、生存期等指標觀察健脾益肺方的療效;應(yīng)用組織免疫熒光,檢測腰段脊髓前角神經(jīng)元核蛋白(Neuronal Nuclei,NeuN

2、)、小膠質(zhì)細胞特異性標志物整合素α M(CD11b)及核轉(zhuǎn)錄因子NF-κ B p65的熒光情況,初步探討健脾益肺方對ALS模型小鼠小膠質(zhì)細胞活化調(diào)控作用及相關(guān)機制。
  方法:
  1.將hSOD1-G93A轉(zhuǎn)基因小鼠隨機分為:生理鹽水組、低濃度健脾益肺方組、中濃度健脾益肺方組和高濃度健脾益肺方組;同窩普通野生型小鼠設(shè)為陰性對照組。每組小鼠6只。模型小鼠按分組予生理鹽水或?qū)?yīng)濃度健脾益肺方灌胃,陰性對照組予等量生理鹽水灌胃。

3、每日灌胃一次。
  2.測定小鼠體重,通過Weydt評分確定發(fā)病時間及生存期,通過懸尾試驗、衣架懸掛試驗、疲勞轉(zhuǎn)棒試驗等評價運動功能。統(tǒng)計分析各組間差異。
  3.各組小鼠終末期經(jīng)取材、固定、冰凍切片后,進行免疫熒光染色。正置熒光顯微鏡×40倍物鏡下觀察并拍照。利用Image J軟件測定前角NeuN陽性細胞計數(shù)、CD11b陽性活化小膠質(zhì)細胞計數(shù)及NF-κ B p65熒光強度核/漿比。統(tǒng)計分析各組間差異。
  結(jié)果:

4、r>  1.體重變化
  治療前,生理鹽水組和低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠體重差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。治療后,前期四組模型小鼠的體重隨時間均呈增加趨勢,增加幅度基本無差異。16周齡開始,各組體重差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。與生理鹽水組模型小鼠比較,低濃度健脾益肺方組體重差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠體重下降幅度明顯延緩,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05、P<0

5、.01)。
  2.發(fā)病期和生存期
  生理鹽水組和低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠的發(fā)病時間依次為:(88.83±4.12)天、(101.33±5.75)天、(108.83±6.68)天、(113.50±10.74)天。與生理鹽水組比較,低濃度健脾益肺方組發(fā)病時間沒有明顯差異,中濃度和高濃度健脾益肺方組模型小鼠的發(fā)病時間明顯延遲,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.986、0.035、0.001)。生理鹽水組和低濃度、中

6、濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠的生存期依次為:(125.17±3.71)天、(132.17±2.93)天、(138.50±5.05)天、(143.83±3.97)天。與生理鹽水組比較,低濃度、中濃度和高濃度健脾益肺方組的生存期顯著延長,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.017、0.000、0.000)。
  3.運動功能:
  衣架懸掛試驗:9-14周齡,生理鹽水組和低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠掉落次數(shù)處于低水平的

7、穩(wěn)定狀態(tài),各組沒有明顯差異。15-16周齡,生理鹽水組掉落次數(shù)迅速增多,同時期健脾益肺方組情況基本穩(wěn)定。17周齡開始,生理鹽水組模型小鼠不能耐受試驗,健脾益肺方組掉落次數(shù)迅速增多。與生理鹽水組模型小鼠比較,低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組掉落次數(shù)減少,差異具有統(tǒng)計學意義(均P<0.01)。
  疲勞轉(zhuǎn)棒試驗:9-13周齡,生理鹽水組和低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠掉落次數(shù)處于低水平的穩(wěn)定狀態(tài),各組沒有明顯差異。14-

8、17周齡,生理鹽水組掉落次數(shù)迅速增多,同時期,健脾益肺方組模型小鼠情況基本穩(wěn)定。18周齡開始,生理鹽水組模型小鼠不能耐受試驗,同時期的健脾益肺方組掉落次數(shù)迅速增多。與生理鹽水組模型小鼠比較,低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組掉落次數(shù)減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  4.NeuN陽性細胞計數(shù)
  生理鹽水組和低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠依次為:(3.83±0.98)個/視野、(4.17±1.17)個

9、/視野、(4.83±1.17)個/視野、(7.83±1.17)個/視野。陰性對照組為:(9.17±0.75)個/視野。與陰性對照組比較,生理鹽水組模型小鼠前角NeuN陽性細胞計數(shù)明顯減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。與生理鹽水組模型小鼠比較,低濃度、中濃度健脾益肺方組模型小鼠的NeuN陽性細胞計數(shù)差異無統(tǒng)計學意義,而高濃度組明顯增多,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
  5.CD11b免疫熒光表達
  激活型小

10、膠質(zhì)細胞計數(shù):生理鹽水組和低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠的CD11b陽性細胞表現(xiàn)為胞體呈不同程度地增大,細胞突起增粗、變短,呈激活的小膠質(zhì)細胞。CD11b陽性細胞激活型小膠質(zhì)細胞計數(shù)依次為:(17.50±1.05)個/視野、(15.00±1.41)個/視野、(12.33±1.63)個/視野、(9.17±1.47)個/視野。陰性對照組為:(0.33±0.52)個/視野。與陰性對照組比較,生理鹽水組模型小鼠激活型小膠質(zhì)細胞計數(shù)明

11、顯增多,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。與生理鹽水組模型小鼠比較,低濃度、中濃度和高濃度健脾益肺方組模型小鼠的CD11b陽性激活型小膠質(zhì)細胞計數(shù)顯著減少,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.05、P<0.01、P<0.01)。
  激活型小膠質(zhì)細胞占比:生理鹽水組和低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠的CD11b陽性細胞中激活型小膠質(zhì)細胞占小膠質(zhì)細胞總計數(shù)比值依次為:(19.15±1.67)%、(16.67±1.76)%、(1

12、3.35±1.61)%、(10.05±1.80)%。陰性對照組為:(0.35±0.55)%。與陰性對照組比較,生理鹽水組模型小鼠的激活型小膠質(zhì)細胞占比明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。與生理鹽水組模型小鼠比較,低濃度健脾益肺方組模型小鼠無明顯差異(P=0.052),而中濃度、高濃度健脾益肺方組激活型小膠質(zhì)細胞占比明顯下降,差異具有統(tǒng)計學意義(均P<0.01)。
  6.NF-κB p65免疫熒光強度核/漿比
  

13、生理鹽水組和低濃度、中濃度、高濃度健脾益肺方組模型小鼠依次為:(1.389±0.035)%、(1.394±0.020)%、(1.211±0.059)%、(1.206±0.056)%。陰性對照組為:(20.42±5.10)%。與陰性對照組比較,生理鹽水組模型小鼠的p65熒光強度核/漿比明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。與生理鹽水組模型小鼠比較,低濃度健脾益肺方組無明顯差異(P=0.995),中濃度和高濃度健脾益肺方組均明顯下降

14、,差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.01)。
  結(jié)論:
  1.hSOD1-G93A轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)病后體重下降嚴重,運動功能減退,生存期縮短;健脾益肺方治療hSOD1-G93A轉(zhuǎn)基因小鼠能延緩發(fā)病時間,延長生存期,保持體重,改善運動功能。
  2.hSOD1-G93A轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)病后存在腰段脊髓前角神經(jīng)細胞丟失、小膠質(zhì)細胞活化增生和NF-κ B p65核轉(zhuǎn)移程度增高;高濃度健脾益肺方能減輕模型小鼠脊髓神經(jīng)元丟失情況;中、高濃

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論