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文檔簡介
1、[目的]探討抗抑郁劑氟西汀/s-西酞普蘭對小膠質細胞不同活化途徑的影響。
[方法]本實驗分為細胞系組(BV2)和原代細胞組,上述兩組進一步分亞組如下:正常對照組,M1型模型組[脂多糖(LPS)+干擾素γ(INF-γ)],M2型模型組[白介素-4(IL-4)],氟西汀干預組(氟西汀與LPS+INF/IL4同時加入細胞培養(yǎng)體系),S-西酞普蘭干預組(西酞普蘭與LPS+INF/IL4同時加入細胞培養(yǎng)體系),作用24小時后,使用實時定
2、量PCR(RT-PCR),酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),蛋白質印跡Westernblot)測定相關炎癥指標表達。
[結果](1)M1型活化:RT-PCR顯示,BV2細胞模型組較空白組IL-1β、IL-6、TNF-a、iNOS mRNA水平均顯著升高,氟西汀組較模型組上述炎癥因子mRNA表達均顯著下降,差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05),而西酞普蘭組僅TNFa mRNA表達顯著下降,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.0308)。原代細
3、胞模型組較空白組上述四種炎癥因子mRNA水平均顯著上升(P<0.05),氟西汀/s-西酞普蘭組與模型組相比,僅IL-6和iNOS mRNA水平均顯著下降(均P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。Western Blot顯示BV2細胞模型較空白組Iba-1、CD86表達顯著增多,氟西汀/s-西酞普蘭組較模型組Iba-1、CD86表達顯著下降,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。Western Blot顯示原代細胞模型較空白組CD86表達顯著
4、增多,氟西汀/s-西酞普蘭組較模型組CD86表達顯著下降,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05),而模型組Iba-1水平較空白組顯著下降(P=0.0031),氟西汀組Iba-1表達量顯著減少(P=0.0095),s-西酞普蘭組無顯著變化。ELISA法顯示BV2模型組較空白組細胞上清中TNFa、IL-1β含量較空白組均顯著上升(P<0.05),氟西汀組較模型組上述炎癥因子含量均顯著下降(P<0.05),而s-西酞普蘭組僅IL-1β含量顯著下
5、降(P=0.0347)。原代細胞模型組較空白組IL-1β含量顯著上升(P<0.05)。氟西汀/s-西酞普蘭組與模型組相比,IL-1β含量顯著下降(P均小于0.001)。
(2) M2型活化:RT-PCR顯示,對于BV2細胞和小膠質原代細胞,模型組較空白組IL-10 mRNA水平均有顯著上升(P<0.05),而氟西汀/s-西酞普蘭組較模型組無顯著變化。Western Blot顯示,模型組較空白組CD206表達均有顯著上升(P<0
6、.05),氟西汀組較模型組CD206水平有顯著上升(均P<0.05),而s-西酞普蘭組則無顯著變化。ELISA法顯示,BV2細胞模型組較空白組細胞上清液中IL-10有顯著上升(P<0.05),但氟西汀/s-西酞普蘭組較模型組無顯著變化。原代細胞模型組較空白組IL-10有顯著上升(P<0.05),氟西汀組較模型組IL-10有顯著上升(P=0.0021),而s-西酞普蘭組有顯著下降(P=0.0012)。
[結論]氟西汀和s-西酞普
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