金屬螯合親和反膠團(tuán)的制備與應(yīng)用初探.pdf

1、反膠團(tuán)萃取技術(shù)在生物活性物質(zhì)如蛋白質(zhì)的分離領(lǐng)域被廣泛的應(yīng)用與研究。但傳統(tǒng)的離子型反膠團(tuán)在萃取過程中往往對(duì)蛋白質(zhì)選擇性低，并且與蛋白質(zhì)之間作用力過強(qiáng)而使蛋白質(zhì)失活。帶有色素親和配基(辛巴藍(lán)，CB)的非離子型反膠團(tuán)解決了蛋白質(zhì)與反膠團(tuán)作用力過強(qiáng)而變性的問題，但是對(duì)離子強(qiáng)度和高濃度的變性劑耐受力差。因此本文研制出新型金屬螯合親和非離子反膠團(tuán)系統(tǒng)，并對(duì)影響此反膠團(tuán)系統(tǒng)的條件如pH，離子強(qiáng)度等進(jìn)行了分析研究。最后，利用此反膠團(tuán)對(duì)蛋白質(zhì)萃取進(jìn)行了初

2、步的探索。 通過雙液相合成的方法將非離子型表面活性劑(Span85)分子結(jié)合螯合劑TED(三羧甲基乙二胺)，通過螯合作用連接金屬配基(Cu2+)，并以正己烷為溶劑制備出Span85-TED-Cu金屬螯合親和反膠團(tuán)。利用水份測(cè)定儀和粒徑測(cè)定儀對(duì)親和反膠團(tuán)的性質(zhì)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，隨著金屬配基Cu2+的引入，Span85-TED-Cu反膠團(tuán)的含水率(W0)，反膠團(tuán)粒徑(Z-average size)均比Span85反膠團(tuán)有顯著的提

3、高。Span85-TED-Cu反膠團(tuán)能夠在較寬的pH范圍(5～9)，較大的離子強(qiáng)度(0.5mol/L)以及高濃度的變性劑(8mol/L Urea)條件下保持含水率不變。 對(duì)Span85-TED-Cu反膠團(tuán)萃取蛋白質(zhì)進(jìn)行初探。研究表明，反膠團(tuán)萃取蛋白質(zhì)受到表面活性劑濃度、金屬配基濃度以及助劑(醇)的影響，但可耐受寬pH范圍、較高離子強(qiáng)度以及高濃度的變性劑。萃取牛血紅蛋白(BH)時(shí)，萃取率 E 達(dá)到70％。助劑的加入可以增加反膠團(tuán)對(duì)