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1、金屬螯合親和層析(Metal Chelate Amrdty Chromatographic,MCAC),又稱固定金屬離子親和層析(Immobilized Metal Ion Affinity Chromato腳hy,IMAC),是一種選擇性好、操作簡(jiǎn)單的蛋白質(zhì)分離方法。共價(jià)固定于高分子微球表面的配基與Ni計(jì),C02+等過(guò)渡金屬離子形成配位數(shù)未飽和的螯合物,基因工程表達(dá)的六聚組氨酸融合蛋白可通過(guò)其組氨酸標(biāo)簽與螫合物通過(guò)配位作用結(jié)合,因此,
2、金屬離子螯合物已被廣泛用于六聚組氨酸融合蛋白的純化。螯合有Ni2+,C02+的磁性復(fù)合微粒也成為新的研究熱點(diǎn)。本研究以瓊脂糖微球和二氧化硅磁性微球?yàn)檩d體,分別合成了表面載有鈷離子.羧甲基天冬氨酸螯合物的金屬螯合親和介質(zhì),并將其用于六聚組氨酸融合蛋白的純化研究,具體內(nèi)容如下: 1、以Sepharose CL-6B為載體,環(huán)氧氯丙烷為活化劑,羧甲基天冬氨酸為螯合配基制備載有C02的金屬螯合親和層析介質(zhì),建立了變性和非變性條件下對(duì)六聚
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