體外循環(huán)術(shù)對先天性心臟病兒童NOD信號的影響.pdf

1、目的：探討體外循環(huán)（cardiopulmonary bypass,CPB）對先天性心臟病(congenital heart disease,CHD)兒童NOD1和NOD2表達水平及功能的影響，為臨床調(diào)控CHD患兒固有免疫狀態(tài)，預防和治療術(shù)后感染提供新思路。
　　方法：收集CHD患兒CPB術(shù)前、術(shù)后、術(shù)后1d、3d、7d五個時間點外周血標本：1.分別采用NOD1的激動劑（Tri-DAP）和NOD2激動劑（MDP）全血刺激4h，采用E

2、LISA技術(shù)檢測上清中TNF-α和IL-6的水平2.采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs），分別用Real-time PCR技術(shù)和Western blot技術(shù)檢測各個時間點NOD1和NOD2的基因及蛋白水平；3.分別用NOD1的激動劑（Tri-DAP）和NOD2激動劑（MDP）刺激各個時間點PBMCs，Western blot技術(shù)檢測RIP2、NF-κB

3、 p65和MAPK p38信號活化水平，進一步評判CPB對NOD1和NOD2下游信號通路的影響。
　　結(jié)果：
　　1.經(jīng)NOD1激動劑（Tri-DAP）或NOD2激動劑（MDP）刺激后，CPB術(shù)前外周血中的炎癥因子IL-6和TNF-α的表達均明顯上調(diào)。與術(shù)前比較，術(shù)后Tri-DAP刺激產(chǎn)生IL-6（P<0.01）和TNF-α（P<0.05）的水平受到明顯抑制，術(shù)后1d開始恢復，術(shù)后7d恢復至術(shù)前水平。與術(shù)前比較，術(shù)后經(jīng)MDP

4、刺激產(chǎn)生IL-6的水平明顯低于術(shù)前（P<0.05），術(shù)后1d恢復至術(shù)前水平；術(shù)后TNF-α的水平也低于術(shù)前，但差異無統(tǒng)計學意義。
　　2.與CPB術(shù)前比較，CHD患兒NOD1的基因和蛋白水平以及NOD2的蛋白水平均在術(shù)后1d明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01），而術(shù)后各個時間點NOD2的基因表達水平與術(shù)前比較無明顯差異。
　　3.與CPB術(shù)前比較，術(shù)后CHD患兒PBMCs中RIP2的磷酸化水平以及下游信號通路NF-κB