高血壓病氣虛血瘀證患者血清誘導血管內(nèi)皮細胞凋亡效應及凋亡相關蛋白P53的研究.pdf

1、目的：
　　探討高血壓病氣虛血瘀證患者血清能否誘導血管內(nèi)皮細胞凋亡并對其作用機制進行相關分析。同時，觀察補陽還五湯的干預效應以驗證“方證相關”。
　　方法：
　　分別收集各種血清,按實驗方案分為六組，分別為高血壓病氣虛血瘀證組，高血壓病非氣虛血瘀證組，健康組，補陽還五湯高、中、低劑量組。各組血清培養(yǎng)液作用于體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞（Human Umbilical Vein Endothlial Cells, HUVE

2、C）后分別用流式細胞儀、激光共聚焦電子顯微鏡、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）和免疫印跡法（Western Blot, WB）觀察和檢測各組細胞凋亡的形態(tài)學改變、凋亡率及相關蛋白P53的表達,最后用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計學處理。
　　結(jié)果：
　　1、與健康組相比，高血壓病氣虛血瘀證組、高血壓病非氣虛血瘀證組、補陽還五湯不同劑量組細胞凋亡率均升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。另外，與高血壓病氣虛血瘀證組相比，補

3、陽還五湯高、中、低劑量組凋亡率降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　2、各組血清作用于HUVEC24 h后,高血壓病氣虛血瘀證組、高血壓病非氣虛血瘀證組均有調(diào)亡小體形成，健康組無細胞凋亡小體和核固縮現(xiàn)象，補陽還五湯高、中、低劑量組均有不同程度的核固縮現(xiàn)象。
　　3、各組血清培養(yǎng)HUVEC24h后與健康組相比，高血壓病氣虛血瘀證P53濃度升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。與高血壓病氣虛血瘀證組比，補陽還五湯不同劑