巴氏梭菌高產(chǎn)1，3-丙二醇的研究.pdf

1、1，3-丙二醇(1，3-PD)是一個具有多種用途的中間化合物，是生產(chǎn)新型PTT纖維的主要單體，具有許多優(yōu)良特性和很好的應用前景。微生物發(fā)酵法生產(chǎn)1，3-丙二醇與化學合成法相比具有顯著的優(yōu)點，因而越來越受到重視，成為當前的研究熱點。 本實驗為提高巴氏梭菌轉(zhuǎn)化甘油生產(chǎn)1，3-丙二醇的能力，采用以離子束與紫外線復合誘變和產(chǎn)物耐受相結(jié)合的平板篩選方法，同時測定了誘變前后甘油代謝途徑中的甘油脫水酶(GDHt)和1，3-丙二醇氧化還原酶(P

2、DOR)的酶活變化，獲得可耐受高濃度1，3-丙二醇的優(yōu)良突變菌株2株，與出發(fā)菌株相比，兩株高產(chǎn)突變菌株的1，3-丙二醇產(chǎn)量分別提高了43％和40％，達到66.84g/L和65.62g/L。 并且對巴氏梭菌發(fā)酵甘油產(chǎn)生1，3-丙二醇的發(fā)酵條件做了研究，通過對pH、發(fā)酵時間、接種量、Mg、Fe和微量元素對巴氏梭菌發(fā)酵甘油產(chǎn)生1，3-丙二醇影響進行分析。結(jié)果說明，pH和菌體生長，1，3-丙二醇合成存在如下規(guī)律：pH高時，菌體生長較快，

3、但1，3-丙二醇終濃度不高。pH較低時，剛好相反。發(fā)酵時間和接種量必須控制在24h和6％，這樣才能保證巴氏梭菌發(fā)酵產(chǎn)生1，3-丙二醇的產(chǎn)量。Mg、Fe和微量元素也要適量添加，量不能過高，高濃度時1，3-丙二醇在發(fā)酵液中不是主要成分，影響1，3-丙二醇的產(chǎn)量，當濃度過低時會影響菌體的生長。最終確定的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基是：甘油40.0 g/L，KH2PO40.5 g/L，K2HPO41.0 g/L，(NH4)2SO43.0 g/L，CaCO32