丁酸梭菌高產(chǎn)1,3-丙二醇菌株誘變選育及培養(yǎng)基優(yōu)化研究.pdf_第1頁
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1、  1,3-丙二醇(1,3-PD)是一個(gè)具有多種用途的中間化合物,是生產(chǎn)新型PTT纖維的主要單體。為了獲得1,3-丙二醇的高產(chǎn)突變株,以丁酸梭菌為出發(fā)菌株進(jìn)行誘變處理,并對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行初步優(yōu)化?! 「视陀啥∷崴缶D(zhuǎn)化生成1,3-丙二醇的研究是在厭氧條件下進(jìn)行的,采用空氣置換和降低氧化還原電位相結(jié)合的方法制備預(yù)還原培養(yǎng)基。取對(duì)數(shù)期單細(xì)胞菌懸液適量,經(jīng)過DES溶液誘變篩選高產(chǎn)突變株;再在紫外線最適照射時(shí)間和NTG合適誘變劑量條件下,將經(jīng)

2、DES誘變得到的高產(chǎn)菌株進(jìn)行UV+NTG復(fù)合誘變,經(jīng)初篩和復(fù)篩后采用氣相色譜法測(cè)1,3-丙二醇的產(chǎn)量以確定高產(chǎn)突變株;分別對(duì)溫度、pH等培養(yǎng)條件和碳源、氮源、酵母膏、金屬離子等組分進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn),確定甘油轉(zhuǎn)化生成1,3-丙二醇的主要影響因素,然后通過正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行培養(yǎng)基優(yōu)化?! ?shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明:丁酸梭菌是嚴(yán)格厭氧菌,產(chǎn)孢子;以丁酸梭菌為出發(fā)菌株,經(jīng)過硫酸二乙酯(DES)誘變及紫外線(UV)和亞硝基胍(NTG)復(fù)合誘變得到突變株C.bu

3、t3037,其1,3-丙二醇產(chǎn)量由出發(fā)菌株的2.2g/L提高到15.7g/L,提高了6.13倍;高濃度甘油對(duì)C.but3037的生長具有較大的抑制作用,當(dāng)甘油濃度為8%時(shí)抑制作用十分明顯;酵母膏是1,3-丙二醇發(fā)酵所必需的營養(yǎng)組分,添加適量的酵母膏將有利于1,3-丙二醇的產(chǎn)生;溫度、pH和接種量對(duì)發(fā)酵有著重要的影響,當(dāng)溫度為35℃、接種量為5%、pH為6.0~7.0時(shí)有利于甘油向1,3-丙二醇的轉(zhuǎn)化;通過對(duì)菌株C.but3037培養(yǎng)基優(yōu)

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