丁酸梭菌高產(chǎn)1，3-丙二醇菌株誘變選育及培養(yǎng)基優(yōu)化研究.pdf

1、　　1，3-丙二醇(1，3-PD)是一個具有多種用途的中間化合物，是生產(chǎn)新型PTT纖維的主要單體。為了獲得1，3-丙二醇的高產(chǎn)突變株，以丁酸梭菌為出發(fā)菌株進(jìn)行誘變處理，并對發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行初步優(yōu)化。　　甘油由丁酸梭菌轉(zhuǎn)化生成1，3-丙二醇的研究是在厭氧條件下進(jìn)行的，采用空氣置換和降低氧化還原電位相結(jié)合的方法制備預(yù)還原培養(yǎng)基。取對數(shù)期單細(xì)胞菌懸液適量，經(jīng)過DES溶液誘變篩選高產(chǎn)突變株；再在紫外線最適照射時間和NTG合適誘變劑量條件下，將經(jīng)

2、DES誘變得到的高產(chǎn)菌株進(jìn)行UV+NTG復(fù)合誘變，經(jīng)初篩和復(fù)篩后采用氣相色譜法測1，3-丙二醇的產(chǎn)量以確定高產(chǎn)突變株；分別對溫度、pH等培養(yǎng)條件和碳源、氮源、酵母膏、金屬離子等組分進(jìn)行單因素實驗，確定甘油轉(zhuǎn)化生成1，3-丙二醇的主要影響因素，然后通過正交實驗進(jìn)行培養(yǎng)基優(yōu)化?！　嶒炑芯拷Y(jié)果表明：丁酸梭菌是嚴(yán)格厭氧菌，產(chǎn)孢子；以丁酸梭菌為出發(fā)菌株，經(jīng)過硫酸二乙酯(DES)誘變及紫外線(UV)和亞硝基胍(NTG)復(fù)合誘變得到突變株C.bu

3、t3037，其1，3-丙二醇產(chǎn)量由出發(fā)菌株的2.2g/L提高到15.7g/L，提高了6.13倍；高濃度甘油對C.but3037的生長具有較大的抑制作用，當(dāng)甘油濃度為8％時抑制作用十分明顯；酵母膏是1，3-丙二醇發(fā)酵所必需的營養(yǎng)組分，添加適量的酵母膏將有利于1，3-丙二醇的產(chǎn)生；溫度、pH和接種量對發(fā)酵有著重要的影響，當(dāng)溫度為35℃、接種量為5％、pH為6.0～7.0時有利于甘油向1，3-丙二醇的轉(zhuǎn)化；通過對菌株C.but3037培養(yǎng)基優(yōu)