蛇足石杉內(nèi)生真菌的分離及生物活性初步研究.pdf

1、本文以藥用植物蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb.)Trev)為材料，進(jìn)行內(nèi)生真菌的分離以及活性菌株的篩選，對其中活性較強(qiáng)菌株進(jìn)行進(jìn)一步研究，結(jié)果如下：
　　1．采用組織塊分離法，從蛇足石杉根、莖、葉中共分離出內(nèi)生真菌180株，初步鑒定為2亞門、4綱、7目、8科、13個屬，其中莖點霉屬(Phoma sp.)、組絲核菌屬(Phacodium sp.)為優(yōu)勢種群，分別占總菌株數(shù)的18.61％和16.15%。內(nèi)生真菌

2、在蛇足石杉的不同部位的數(shù)量、分布和種群上存在有差異，莖中最多，其次為葉片，根中最少。從分離時間來看，4-5天和11-13天分離出的內(nèi)生真菌株數(shù)量較多。
　　2．選擇具有代表性的菌株68株，以纖溶活性、抗細(xì)菌、抗植物病原真菌、抗腫瘤細(xì)胞、以及代謝產(chǎn)物的HPLC檢測五個模型進(jìn)行活性菌株的實驗，從中篩選到部分具有不同活性的菌株。
　　3．結(jié)合各篩選模型，選取一株活性最好的菌株HU046進(jìn)行ITS序列測定比對，將菌株HU046初步鑒

3、定為莖點霉(Phoma sp.)。
　　4．通過對蛇足石杉內(nèi)生真菌HU046的各種單一因子的培養(yǎng)生物學(xué)特性研究發(fā)現(xiàn)：其最適生長溫度為26℃；最適pH4.0；適合在黑暗條件下生長；最佳碳源為玉米粉；最佳氮源為酵母浸膏；最佳C/N30:1。
　　5．運用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對菌株HU046的發(fā)酵液揮發(fā)性成分進(jìn)行研究，共檢出11種成分，主要為烷類，酮類，酚類和酯類化合物。
　　6．采取大孔樹脂、硅膠柱層析、凝膠柱層析、薄層層