細(xì)胞外基質(zhì)蛋白SRPX2對HUVECs血管生成能力的影響.pdf

1、分類號分類號：R364密級：密級：公開公開研究生學(xué)位論文論文題目（中文）論文題目（中文）細(xì)胞外基質(zhì)蛋白細(xì)胞外基質(zhì)蛋白SRPX2SRPX2對HUVECsHUVECs血管生成血管生成能力能力的影響的影響論文題目（外文）論文題目（外文）TheinfluenceofextracellularmatrixproteinSRPX2onangiogenesisabilityofHUVECs研究生姓名研究生姓名樊江浩樊江浩學(xué)科、專業(yè)學(xué)科、專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)臨

2、床醫(yī)學(xué)消化內(nèi)科消化內(nèi)科研究方向研究方向消化道腫瘤消化道腫瘤學(xué)位級別學(xué)位級別碩士導(dǎo)師姓名、職稱導(dǎo)師姓名、職稱吳靜吳靜教授教授論文工作論文工作起止年月起止年月20152015年4月至月至20162016年3月論文提交日期論文提交日期20162016年3月論文答辯日期論文答辯日期20162016年55月學(xué)位授予日期學(xué)位授予日期20162016年66月校址：甘肅省蘭州市校址：甘肅省蘭州市I細(xì)胞外基質(zhì)蛋白細(xì)胞外基質(zhì)蛋白SRPX2SRPX2對HUV

3、ECsHUVECs血管生成能力血管生成能力的影響的影響中文摘要中文摘要目的目的評價不同來源的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白含sushi重復(fù)蛋白X連鎖2（SRPX2）對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）血管生成能力的影響。方法方法分別用重組pcDNA3.1SRPX2及空載質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞和SW480細(xì)胞后收集條件培養(yǎng)基，作用于HUVECs；用pcDNA3.1SRPX2及空載質(zhì)粒直接轉(zhuǎn)染HUVECs，各部分實(shí)驗(yàn)均分為轉(zhuǎn)染組（添加pcDNA3.1SR

4、PX2質(zhì)粒）、陰性對照組（添加pcDNA3.1質(zhì)粒）和空白對照組（未添加質(zhì)粒）三組。用Westernblot檢測SRPX2蛋白的表達(dá)情況。采用CCK8試劑盒檢測細(xì)胞增殖能力。分別用Transwell（共培養(yǎng)）遷移實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞的遷移能力。用Matrigel基質(zhì)膠體外管腔形成實(shí)驗(yàn)觀察HUVECs管腔形成能力。結(jié)果結(jié)果質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞和SW480細(xì)胞收集條件培養(yǎng)基作用于HUVECs24、48、72h后，三組各時間點(diǎn)組間細(xì)胞

5、增殖能力均無明顯差異（p0.05）；直接轉(zhuǎn)染HUVECs，轉(zhuǎn)染組24、48、72h各時間點(diǎn)細(xì)胞增殖能力較陰性對照組和空白對照組均明顯增強(qiáng)（p0.05）。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞收集條件培養(yǎng)基作用于HUVECs，轉(zhuǎn)染組管腔樣結(jié)構(gòu)分支點(diǎn)數(shù)為（974）個視野，明顯多于陰性對照組（573）和空白對照組（543）個視野（p0.05）；質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SW480細(xì)胞收集條件培養(yǎng)基作用于HUVECs，轉(zhuǎn)染組管腔樣結(jié)構(gòu)分支點(diǎn)數(shù)為（865）個視野，明顯多于陰性

6、對照組（523）和空白對照組（514）個視野（p0.05）；質(zhì)粒直接轉(zhuǎn)染HUVECs，轉(zhuǎn)染組管腔樣結(jié)構(gòu)分支點(diǎn)數(shù)為（342）個視野，明顯多于陰性對照組（152）和空白對照組（132）個視野（p0.05）；添加通路抑制劑后SW480條件培養(yǎng)基管腔樣結(jié)構(gòu)分支點(diǎn)數(shù)空白對照組為（121）個視野、陰性對照組為（112）個視野、轉(zhuǎn)染組為（263）個視野、轉(zhuǎn)染后添加uPAR抗體組為（112）個視野、轉(zhuǎn)染后添加FAK抑制劑組為（0）個視野、轉(zhuǎn)染后添加PI

7、3K抑制劑組為（103）個視野、轉(zhuǎn)染后添加MAPK抑制劑組為（152）個視野、轉(zhuǎn)染后添加DMSO組為（231）個視野，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05）。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞收集條件培養(yǎng)基作用于HUVECs，轉(zhuǎn)染組劃痕6和12h細(xì)胞遷移距離均明顯大于陰性對照組和空白對照組，分別為（89.725.70）、（37.146.81）和（35.874.28）μm，（135.384.95）、（65.008.02）和（63.113.79）μm，（