益氣活血法對腦出血大鼠血腫周圍細胞外基質(zhì)表達的影響.pdf

1、目的:腦出血(intracerebralhemorrhage，ICH)是腦血管病中的危重類型，以其高發(fā)病率，嚴重的致死率和致殘率而受到人們越來越多的關注，屬于祖國醫(yī)學的“中風”范疇。但是目前除了外科手術清除血腫和脫水降顱內(nèi)壓外，尚無其它有效的治療方法。自清代著名醫(yī)家王清任創(chuàng)立益氣活血名方補陽還五湯以來，益氣活血法在臨床上治療中風得到廣泛的應用。細胞外基質(zhì)(Extracellularmatrix，ECM)主要是由膠原(collagens)

2、、連接糖蛋白（包括Laminin，F(xiàn)ibronectin）等不溶結構成分混合而成的組織特異性三維結構，在腦出血后微血管系統(tǒng)重建過程中ECM與血管新生(angiogenesis)相互作用，即血管新生可以導致ECM成分的降解、重塑，而ECM對新生血管內(nèi)皮細胞增殖、遷移、存活和新生血管成型、成熟作用重要。本實驗通過用Ⅶ型膠原酶誘導大鼠腦出血，選益氣活血法代表方補陽還五湯全方及其益氣組分、活血組分拆方干預，觀察腦出血大鼠腦損傷區(qū)組織細胞外基質(zhì)成

3、分Ⅳ型膠原(Collagen-Ⅳ，C-Ⅳ)、纖維連接蛋白(Fibronectin，F(xiàn)N)、層粘連蛋白-1(Liminin-1，LN-1)以及層粘連蛋白-5(Liminin-5，LN-5)表達的變化，探討益氣活血法治療腦出血的作用機制。
　　 方法:150只Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為5組:假手術組、模型組、益氣組、活血組和益氣活血組。立體定位向腦內(nèi)蒼白球注入含0.5UⅦ型膠原酶的滅菌生理鹽水2.5μL復制腦出

4、血模型。益氣組、活血組與益氣活血組分別予補陽還五湯益氣組分、補陽還五湯活血組分及補陽還五湯全方灌胃。假手術組和模型組大鼠灌服等體積蒸餾水。分別于造模術后并灌胃3d、7d、14d、21d、28d五個時間點隨機抽取6只大鼠深麻醉后迅速剝離顱骨，并分離鼠腦取得血腫區(qū)腦組織，采用免疫組化方法觀察各組3、7、14、21、28天血腫周圍細胞外基質(zhì)成分C-Ⅳ、FN、LN-1以及LN-5表達的空間位置變化，其結果進行平均光密度掃描半定量分析。
　

5、　 結果:假手術組在不同時間點細胞外基質(zhì)成分均未見明顯表達。模型組C-Ⅳ在3天時即在血腫周圍表達，21天達到高峰，于28天開始下降，益氣活血組表達高峰持續(xù)至21天，并在多個時點表達明顯高于同時點模型組。FN在3天時即在血腫周圍表達，7-21天時持續(xù)表達增加，高峰在21天達到，28天時表達顯著下降，益氣活血組在3-28天時均高于同時點模型組。LN-1在3天時血腫周圍區(qū)域即有表達，7天時表達增高，21天達到高峰，28天表達下降，益氣活血組

6、在3-28天表達高于同時點模型組。LN-5陽性表達在3天時即出現(xiàn)，21天時表達增高達到高峰，并在28天時出現(xiàn)下降，益氣活血組在3-28天時表達高于同時點模型組。
　　 結論:1.腦出血后血腫周圍細胞外基質(zhì)中C-Ⅳ、FN、LN-1以及LN-5表達增強，可能參與腦出血后病灶組織血管新生;2.益氣活血法能夠能促進C-Ⅳ、FN、LN-1以及LN-5的表達，顯著改善腦出血后血腫區(qū)的血管新生情況，有利于腦出血損傷區(qū)的微血管系統(tǒng)重建，從而實現(xiàn)