AcSDKP對(duì)真皮成纖維細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)合成的影響.pdf

1、創(chuàng)面的異常修復(fù)導(dǎo)致增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的形成在臨床工作中非常常見，其發(fā)病機(jī)理仍不完全清楚。迄今研究已經(jīng)表明：皮膚組織中成纖維細(xì)胞的過(guò)度增殖以及細(xì)胞外基質(zhì)的合成與降解失衡是導(dǎo)致病理性瘢痕形成的基礎(chǔ)；生長(zhǎng)因子和轉(zhuǎn)錄因子在不同水平協(xié)同作用調(diào)控著細(xì)胞外基質(zhì)的代謝過(guò)程，因而，細(xì)胞外基質(zhì)的代謝異常與它們的調(diào)節(jié)作用密切相關(guān)。大量研究表明，TGF-β可刺激成纖維細(xì)胞產(chǎn)生多種基質(zhì)蛋白、基質(zhì)蛋白酶抑制劑和整合素受體，增加細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的生成，調(diào)節(jié)傷口

2、中各細(xì)胞間的相互作用，在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的形成過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。
　　 本課題通過(guò)觀察N-乙?；?絲氨酰-天冬氨酰-賴氨酰-脯氨酸（AcSDKP）對(duì)真皮成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的影響，探討其在瘢痕防治中的應(yīng)用價(jià)值，在此基礎(chǔ)上，又進(jìn)一步觀察其對(duì)真皮成纖維細(xì)胞自分泌TGF-β1的影響，探討其抑制膠原合成的可能作用機(jī)制，為AcSDKP防治病理性瘢痕的研究奠定基礎(chǔ)。
　　 第一部分 AcSDKP對(duì)真皮成纖維細(xì)胞增殖及膠原

3、合成的影響。
　　 目的：通過(guò)觀察N-乙?；?絲氨酰-天冬氨酰-賴氨酰-脯氨酸（AcSDKP）對(duì)真皮成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的影響，探討其在瘢痕防治中的應(yīng)用價(jià)值。
　　 方法：真皮成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定后，不同濃度的AcSDKP（10-7，10-8，10-9，10-10，10-11mol/1）進(jìn)行干預(yù)，另設(shè)立空白對(duì)照組。WST-8法檢測(cè)真皮成纖維細(xì)胞增殖；RT-PCR技術(shù)檢測(cè)人真皮成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA表達(dá)。

4、
　　 結(jié)果：與空白對(duì)照組相比，10-10mol/1 AcSDKP抑制人真皮成纖維細(xì)胞增殖作用最強(qiáng)；10-8mol/1和10-9mol/1 AcSDKP對(duì)Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA表達(dá)的抑制作用最顯著。
　　 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AcSDKP能夠抑制人真皮成纖維細(xì)胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型膠原基因的合成，有望應(yīng)用于病理性瘢痕的防治。
　　 第二部分 AcSDKP對(duì)真皮成纖維細(xì)胞自分泌TGF-β1的影響。
　　 目的：通過(guò)觀察

5、N-乙酰基-絲氨酰-天冬氨酰-賴氨酰-脯氨酸（AcSDKP）對(duì)真皮成纖維細(xì)胞表達(dá)TGF-β1的影響，探討其抑制膠原合成的可能作用機(jī)制，并為AcSDKP防治病理性瘢痕的研究奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：真皮成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定后，給予不同濃度AcSDKP（10-7，10-8，10-9，10-10，10-11mol/L）干預(yù)，設(shè)立空白對(duì)照組。酶聯(lián)免疫法檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞上清液TGF-β1含量；RT-PCR技術(shù)檢測(cè)真皮成纖維細(xì)胞TGF-β1

6、mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果：與空白對(duì)照組相比，10-8，10-9，10-10mol/L AcSDKP可使培養(yǎng)細(xì)胞上清液中的TGF-β1顯著減少，各濃度組間差異無(wú)顯著性；10-7，10-8，10-9，10-10mol/L AcSDKP對(duì)TGF-β1 mRNA表達(dá)有顯著的抑制作用，且各濃度組間的抑制作用無(wú)差異；
　　 結(jié)論：AcSDKP能夠抑制真皮成纖維細(xì)胞自分泌TGF-β1，可能是其影響真皮成纖維細(xì)胞膠原合成的機(jī)制之一，A