犬尿氨酸酶對(duì)人宮頸腺癌順鉑耐藥細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf

1、目的：探討犬尿氨酸酶（Kynureninase,KYNU）對(duì)Hela/DDP細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。
　　方法：1、培養(yǎng)Hela及Hela/DDP細(xì)胞，通過(guò)qPCR和Western Blot方法檢測(cè)KYNU在Hela和Hela/DDP細(xì)胞株中分別在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。2、構(gòu)建KYNU過(guò)表達(dá)質(zhì)粒，增強(qiáng)KYNU在低表達(dá)細(xì)胞中的表達(dá)量。3、應(yīng)用Transwell方法、流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)KYNU過(guò)表達(dá)后對(duì)耐藥細(xì)胞遷移、侵襲能力及細(xì)胞凋

2、亡率的影響。
　　結(jié)果：1、通過(guò)qPCR及Western Blot方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)KYNU在Hela細(xì)胞中mRNA及蛋白水平的表達(dá)均高于 Hela/DDP細(xì)胞。2、應(yīng)用 Transwell方法檢測(cè)HeLa/DDP細(xì)胞、Hela/DDP-空載細(xì)胞、Hela/DDP-KYNU細(xì)胞的遷移能力，24小時(shí)穿過(guò)的胞數(shù)分別為125±6、123±5和68±5，Hela/DDP-KYNU組細(xì)胞遷移數(shù)較Hela/DDP-空載組少（P﹤0.05）。3、Tr

3、answell方法檢測(cè)3種細(xì)胞侵襲能力，HeLa/DDP組、HeLa/DDP-空載組、HeLa/DDP-KYNU組24小時(shí)穿過(guò)的細(xì)胞數(shù)分別為69±9、67±5、65±4，KYNU蛋白不影響HeLa/DDP細(xì)胞侵襲能力（P＞0.05）。4、Hela/DDP組、Hela/DDP-空載組、HeLa/DDP-KYNU細(xì)胞凋亡率分別是3.2％±0.09%、4.0%±1.9%、32.4%±3.3%。Hela/DDP-KYNU組細(xì)胞凋亡率較Hela/