乏氧對牙周膜細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文乏氧對牙周膜細(xì)胞生物學(xué)特性的影響姓名：唐開亮申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：李紓20090504山東大學(xué)碩士學(xué)位論文Trizol兩步法分別提取細(xì)胞總RNA，采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)檢測HIF1QmRNA和VEGFmRNA的表達(dá)情況。4將牙周膜細(xì)胞以2X104個／ml接種于置有蓋玻片的6孔板中，按實(shí)驗(yàn)分組移入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，免疫組化技術(shù)檢測HIF1Ct與VEGF的表達(dá)情況。結(jié)果：1所有組別的細(xì)胞

2、增殖率隨培養(yǎng)時間呈依賴性的增高。乏氧24h與對照組相比增殖較大，但缺乏統(tǒng)計學(xué)差異。乏氧組乏氧48h與對照組相比增殖活性增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義◇o05)。2所有組別細(xì)胞的ALP活性隨培養(yǎng)時間而降低，但乏氧24h和48h與對照組相比ALP活性明顯降低，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義◇005)。3乏氧組牙周膜細(xì)胞HIF1QmRNA的表達(dá)與對照組無統(tǒng)計學(xué)意義的差別。乏氧24h與48h牙周膜細(xì)胞VEGFmRNA的表達(dá)明顯高于對照組(球005)。4細(xì)胞爬片免疫

3、組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：乏氧24h與48h的牙周膜細(xì)胞HIF一1Q表達(dá)呈陽性反應(yīng)，乏氧24h大量HIF1a蛋白在胞核積聚，乏氧48h陽性染色顆粒在胞質(zhì)與胞核中沉積，而常氧環(huán)境下培養(yǎng)的細(xì)胞無觀察到HIF一1d蛋白的表達(dá)p001)。VEGF的表達(dá)呈時間依賴性增加，常氧48h后VEGF呈微弱陽性表達(dá)，乏氧組24h與48hVEGF的染色明顯強(qiáng)于對照組(薩O01)。結(jié)論：乏氧使牙周膜細(xì)胞增殖能力提高，ALP活性降低，HIF1Q與VEGF表達(dá)增加。雖