“三水冬荷”的親緣關(guān)系鑒定及耐寒基因的表達分析.pdf

1、本研究首先采用ISSR分子標記分析了“三水冬荷”和普通荷花品種的親緣關(guān)系，推測其遺傳來源；然后運用半定量PCR方法比較了“三水冬荷”和普通荷花品種幼苗在低溫脅迫中的5個耐寒基因的表達模式，以檢驗“三水冬荷”是否比普通荷花品種耐寒。 篩選了12條ISSR引物對包括3個“三水冬荷”品種(冬紅花、雪里紅花、傲霜)在內(nèi)的87個荷花品種進行了ISSR分析，共擴增出138條帶，其中多態(tài)帶77條，多態(tài)率為55.8％，具有比較低的遺傳多態(tài)性，這

2、可能與其主要靠地下莖進行無性繁殖和長期的人工選擇有關(guān)。聚類分析表明中國蓮種系和美國蓮種系遺傳分化較大，支持將其處理為中國蓮和美國蓮兩個亞種。3個“三水冬荷”品種親緣關(guān)系很近，可能均由相同或相近的品種選育而來。3個“三水冬荷”品種與幾個中美雜種蓮種系品種和中國蓮種系品種具有較近的親緣關(guān)系，這表明三水冬荷很可能來自于中美雜種蓮，并且遺傳組成上以中國蓮的遺傳物質(zhì)為主，同時包含少部分美國蓮的遺傳物質(zhì)。一些基于花色、花瓣數(shù)目、株型的形態(tài)分類與遺傳

3、組成上沒有明顯的相關(guān)性，但考慮園藝植物品種分類實用的原則，應(yīng)予以保留。 選取2個“三水冬荷”品種(冬紅花和雪里紅花)和2個普通荷花品種(湘蓮和太空蓮)進行低溫脅迫生理實驗，各品種種子在25℃下萌發(fā)5天后轉(zhuǎn)入7-12℃處理15天，再重新移回25℃進行恢復生長。結(jié)果表明，低溫處理下“三水冬荷”和普通荷花品種均停止生長，但保持綠葉，低溫處理過后都能恢復生長。 選用了1個“三水冬荷”品種(冬紅花)和2個普通荷花品種(湘蓮和紅頭巾

4、)，取其種子于25℃下萌發(fā)，兩天后移入4℃冷處理兩天，之后再移入25℃恢復生長兩天。對5個耐寒相關(guān)基因NnHSP90，NnMT2a，NnMT2b，NnEDRl5，NnMnSOD的表達進行了半定量PCR實驗分析。結(jié)果表明，在冷處理或者冷處理后的恢復過程中，冬紅花要么與紅頭巾或湘蓮的基因表達模式相似，要么三個品種一致，要么冬紅花表現(xiàn)出較低的耐寒性。因此“三水冬荷”秋冬季開花、群體花期長不大可能是因為有更高的耐寒性，而很可能與冬荷品種地下莖不