親緣關(guān)系密切的12個(gè)辣椒品種的AFLP鑒定.pdf

1、辣椒是一種世界性的蔬菜或調(diào)味品，在我國各地廣泛栽培，且產(chǎn)量居世界首位。我國對(duì)辣椒育種非常重視，自20世紀(jì)80年代以來，已選育各種不同的辣椒新品種100多個(gè)，辣椒產(chǎn)區(qū)的主栽品種已更新3～4代，對(duì)提高單產(chǎn)和改進(jìn)品質(zhì)起到了重要作用。但傳統(tǒng)辣椒育種所利用的基因越來越集中到少數(shù)種質(zhì)上，因此隨著品種的不斷更新，遺傳基礎(chǔ)變得越來越狹窄，形態(tài)區(qū)分難度也越來越大，新品種的新穎性和特異性鑒定缺少依據(jù)，為生產(chǎn)上品種的形態(tài)鑒定、新品種的認(rèn)定或?qū)彾◣砝щy。近年

2、來，隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入，利用分子標(biāo)記鑒定品種顯示出巨大的潛力，分子標(biāo)記可在生長發(fā)育的任何時(shí)期鑒定，簡工節(jié)本，將會(huì)大大提高辣椒品種鑒定的效率。 本論文在進(jìn)行植物學(xué)性狀觀察的基礎(chǔ)上，利用AFLP分子標(biāo)記對(duì)在杭州及周邊地區(qū)廣泛栽培、親緣關(guān)系密切的的12份辣椒品種進(jìn)行鑒定。所得結(jié)果如下： (1)利用SPSS16.0分析軟件的Bivariate法對(duì)12個(gè)辣椒品種的20個(gè)農(nóng)藝性狀進(jìn)行了相關(guān)分析。結(jié)果顯示株高與葉寬、葉長×寬

3、、葉柄長呈極顯著性正相關(guān)，葉長×寬與葉長、葉寬、葉柄長均達(dá)到極顯著正相關(guān)，株高與果肉厚呈負(fù)相關(guān)，葉寬、節(jié)間長與果橫徑顯著性正相關(guān)，葉寬、葉長×寬、平均單果重與單株結(jié)果數(shù)達(dá)到顯著性負(fù)相關(guān)，單果重與果縱莖、果肉厚顯著性正相關(guān)，而與單株結(jié)果數(shù)顯著性負(fù)相關(guān)，果橫徑、單株結(jié)果數(shù)與前期產(chǎn)量存在顯著性正相關(guān)。 (2)利用辣椒的23個(gè)表型性狀所獲獲得的數(shù)據(jù)矩陣進(jìn)行聚類分析，經(jīng)過SPSS16.0分析軟件的Furtherest Neighbor法分

4、析得到親緣關(guān)系樹狀。遺傳相似系數(shù)為0.54～0.93，平均為0.75，標(biāo)準(zhǔn)差為0.09，變異系數(shù)為0.12。 (3)辣椒葉片由于含有大量的酚類和多糖，DNA提取時(shí)容易降解，各種文獻(xiàn)結(jié)論也不大相同。本文采用SDS法、改良的CTAB法處理A(提取緩沖液中加1％PVP-360和1％巰基乙醇)和處理B(提取緩沖液中加0.2％DTT)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)SDS法提取的辣椒DNA降解最嚴(yán)重，A260/A280為1.0~1.3；CTAB法處理A提取

5、的辣椒DNA也有所降解，A260/A280為1.3～1.7；CTAB法處理B提取的辣椒DNA電泳條帶整齊，A260/A280在1.75～1.95。 (4)以8個(gè)EcoR Ⅰ引物，8個(gè)Mse Ⅰ引物組成64對(duì)引物組合，用2個(gè)辣椒品種進(jìn)行篩選，選出條帶清晰，多態(tài)性豐富的引物10對(duì)。利用10對(duì)引物對(duì)親緣關(guān)系密切的12個(gè)品種進(jìn)行擴(kuò)增，獲得96條清晰的多態(tài)性條帶，利用SPSS16.0軟件構(gòu)建親緣關(guān)系樹狀圖，遺傳相似系數(shù)為0.2～0.88，