青藏高原蕨麻種質(zhì)資源形態(tài)標(biāo)記及分子標(biāo)記研究.pdf

1、蕨麻屬薔薇科(Rosacrae)，委陵菜屬(Potentilla)，是鵝絨委陵菜(Potentilla anserina L.)的變種，其經(jīng)濟(jì)價值、生態(tài)價值、園藝價值、營養(yǎng)價值及藥用價值等獨(dú)具特色。蕨麻主要分布于青海省、西藏自治區(qū)、甘肅省和四川省，其中青海省分布最廣、儲量最大、品質(zhì)最好。
　　目的：從形態(tài)學(xué)和DNA水平上，用形態(tài)標(biāo)記和AFLP分子標(biāo)記研究青藏高原蕨麻種質(zhì)資源之間的遺傳多樣性，為青藏高原蕨麻種質(zhì)資源鑒定及優(yōu)質(zhì)資源綜合

2、評價提供依據(jù)。
　　方法：用形態(tài)標(biāo)記和AFLP分子標(biāo)記研究青藏高原蕨麻種質(zhì)資源之間的遺傳多樣性。
　　結(jié)果：⑴用形態(tài)標(biāo)記研究青藏高原蕨麻種質(zhì)資源遺傳多樣性的結(jié)果：用海拔、葉色類型、復(fù)葉長與復(fù)葉寬比、復(fù)葉葉柄長、小葉長與小葉寬比、小葉鋸齒數(shù)(個)、小葉鋸齒深度類型、小葉間距、小葉數(shù)、匍匐莖數(shù)目、匍匐莖粗、匍匐莖長度、塊根是否膨大、塊根形態(tài)、塊根色澤、塊根大小等十六個指標(biāo)進(jìn)行了聚類分析，依據(jù)上述16個指標(biāo)的聚類結(jié)果種質(zhì)資源鑒定及

3、從不同用途綜合評價青藏高原蕨麻種質(zhì)資源，篩選出優(yōu)質(zhì)蕨麻種質(zhì)資源。葉色類型、復(fù)葉長和復(fù)葉寬比、小葉長和小葉寬比、小葉鋸齒數(shù)（個）、小葉鋸齒深度類型、小葉數(shù)(個)和塊根是否膨大等7個變量進(jìn)行主城分分析和聚類分析，評價青藏高原蕨麻優(yōu)良種質(zhì)資源：主城分分析和聚類分析結(jié)果一致，分為四個級別：青海海北地區(qū)、青海果洛地區(qū)和青海玉樹州地區(qū)的蕨麻品質(zhì)及經(jīng)濟(jì)價值高，西藏那曲地區(qū)和西藏林芝地區(qū)的蕨麻品質(zhì)及經(jīng)濟(jì)價值中等，青海黃南海南地區(qū)、青海海東地區(qū)和甘肅南部

4、地區(qū)的蕨麻品質(zhì)及經(jīng)濟(jì)價值一般，青海海西地區(qū)和西藏日喀則地區(qū)的蕨麻品質(zhì)差，其園藝及生態(tài)價值較高。⑵蕨麻的AFLP分子標(biāo)記研究青藏高原蕨麻種質(zhì)資源的遺傳多樣的結(jié)果：用熒光標(biāo)記的PstI/MseI型、HindIII/MseI型和EcoRI/MseI型的三種AFLP分子標(biāo)記的試劑盒篩選蕨麻種質(zhì)資源的遺傳多樣性，其中用熒光標(biāo)記的EcoRI/MseI型AFLP分子標(biāo)記研究的遺傳多樣性較豐富。用64對引物組合對210份供試材料進(jìn)行AFLP引物篩選出8

5、對引物組合獲得多態(tài)性高且質(zhì)量好的AFLP指紋圖譜。8對引物組合共標(biāo)記出1728條譜帶，其中1581為條多態(tài)帶，147為單態(tài)位點(diǎn)。青海(QH)蕨麻居群的多態(tài)性比率為86.46％，青藏高原蕨麻總的居群（種）的多態(tài)性比率為91.49%>70%；青海(QH)蕨麻居群的平均每個位點(diǎn)的等位基因數(shù)目(A)為1.8646+0.3409，在3個青藏高原蕨麻居群的水平上的平均每個位點(diǎn)的等位基因數(shù)目(A)為1.7184+0.4254，青藏高原蕨麻總的居群（種

6、）的平均每個位點(diǎn)的等位基因數(shù)目(A)為1.9149+0.2770；青海(QH)蕨麻居群和西藏(XZ)蕨麻居群的平均每個位點(diǎn)上等位基因的有效數(shù)目（Ae)為1.2236+0.2843和1.2368+0.3138，在3個青藏高原蕨麻居群的水平上，平均每個位點(diǎn)上等位基因的有效數(shù)目（Ae)為1.2188+0.2981，青藏高原蕨麻總的居群（種）的平均每個位點(diǎn)上等位基因的有效數(shù)目（Ae)為1.2341+0.2910；青海(QH)蕨麻居群和西藏(XZ

7、)蕨麻居群的基因多樣度指數(shù)（H e)為0.1470+0.1558和0.1487+0.1708，在3個青藏高原蕨麻居群的水平上，基因多樣度指數(shù)（H e)為0.1398+0.1631，青藏高原蕨麻總的居群（種）的基因多樣度指數(shù)（H e)為0.1529+0.1582；青海(QH)蕨麻居群的Shannon指數(shù)為0.2441，在3個青藏高原蕨麻居群的水平上的Shannon指數(shù)為0.2274，在種的水平上的種內(nèi)總遺傳多樣性(Hsp)為0.2533+

8、0.2215，居群內(nèi)遺傳多樣性(Hpop)為0.2274+0.2326，青藏高原蕨麻居群內(nèi)遺傳多樣所占比率(%)(Hpop/Hsp)為0.8978，青藏高原蕨麻居群間遺傳多樣性所占比率(%)((Hsp-Hpop)/Hsp)為0.1022。在青藏高原蕨麻居群的種的水平上，蕨麻種內(nèi)基因多樣性指數(shù)(HT)為0.1490+0.0254較大，蕨麻居群內(nèi)的基因多樣性指數(shù)(HS)為0.1398+0.0220較大，蕨麻不同居群的基因分化系數(shù)（GST)為

9、0.0617，在總的基因（遺傳）變異中6.17%的變異存在于居群之間，93.83%的變異存在于居群內(nèi)，總居群的基因流(Nm)為7.7428>1。同一個產(chǎn)地的青藏高原蕨麻種質(zhì)資源之間的相異系數(shù)存在不同程度的差異。不同產(chǎn)地的青藏高原蕨麻種質(zhì)資源之間的相異系數(shù)差異程度也不同。用遺傳一致度(I)和遺傳距離(D聚類結(jié)果跟用Dice相似系數(shù)聚類結(jié)果一致，每個地區(qū)的樣品先聚類在一起，分為三大類，甘肅(GS)和青海(QH)兩個居群首先聚在一起，然后再跟

10、西藏(XZ)蕨麻居群聚在一起，這個結(jié)果跟蕨麻三個自然居群的地理位置一致，甘肅(GS)和青海(QH)位于三個居群的東部，西藏(XZ)位于三個居群的西部。
　　結(jié)論：用蕨麻的形態(tài)標(biāo)記和AFLP分子標(biāo)記分析的上述結(jié)果客觀的反映了青藏高原蕨麻種質(zhì)資源的遺傳多樣性及其地理位置。用形態(tài)標(biāo)記和AFLP分子標(biāo)記鑒定出優(yōu)良品質(zhì)蕨麻及確定了蕨麻種質(zhì)資源的遺傳多樣。用蕨麻的形態(tài)標(biāo)記和AFLP分子標(biāo)記聚類分析結(jié)果相同，表明甘肅(GS)和青海(QH)居群親

11、緣關(guān)系最近，再跟西藏(XZ)居群親緣關(guān)系較近。青藏高原蕨麻種質(zhì)資源的遺傳多樣性較豐富。青藏高原蕨麻種質(zhì)資源的同一個產(chǎn)地供試材料之間的相異系數(shù)存在不同程度的差異。不同產(chǎn)地蕨麻種質(zhì)資源之間的相異系數(shù)差異程度也不同。3個蕨麻居群間有一定的遺傳變異，為6.17%較小，絕大部分的遺傳變異及多樣性集中3個蕨麻居群內(nèi)部，為93.83%較大。蕨麻總居群內(nèi)的等位基因的變異較大，蕨麻總居群的基因多樣性較豐富，蕨麻總居群能夠防止基因（遺傳）漂變引起的蕨麻居群