青藏高原蕨麻種質資源形態(tài)標記及分子標記研究.pdf

1、蕨麻屬薔薇科(Rosacrae)，委陵菜屬(Potentilla)，是鵝絨委陵菜(Potentilla anserina L.)的變種，其經(jīng)濟價值、生態(tài)價值、園藝價值、營養(yǎng)價值及藥用價值等獨具特色。蕨麻主要分布于青海省、西藏自治區(qū)、甘肅省和四川省，其中青海省分布最廣、儲量最大、品質最好。
　　目的：從形態(tài)學和DNA水平上，用形態(tài)標記和AFLP分子標記研究青藏高原蕨麻種質資源之間的遺傳多樣性，為青藏高原蕨麻種質資源鑒定及優(yōu)質資源綜合

2、評價提供依據(jù)。
　　方法：用形態(tài)標記和AFLP分子標記研究青藏高原蕨麻種質資源之間的遺傳多樣性。
　　結果：⑴用形態(tài)標記研究青藏高原蕨麻種質資源遺傳多樣性的結果：用海拔、葉色類型、復葉長與復葉寬比、復葉葉柄長、小葉長與小葉寬比、小葉鋸齒數(shù)(個)、小葉鋸齒深度類型、小葉間距、小葉數(shù)、匍匐莖數(shù)目、匍匐莖粗、匍匐莖長度、塊根是否膨大、塊根形態(tài)、塊根色澤、塊根大小等十六個指標進行了聚類分析，依據(jù)上述16個指標的聚類結果種質資源鑒定及

3、從不同用途綜合評價青藏高原蕨麻種質資源，篩選出優(yōu)質蕨麻種質資源。葉色類型、復葉長和復葉寬比、小葉長和小葉寬比、小葉鋸齒數(shù)（個）、小葉鋸齒深度類型、小葉數(shù)(個)和塊根是否膨大等7個變量進行主城分分析和聚類分析，評價青藏高原蕨麻優(yōu)良種質資源：主城分分析和聚類分析結果一致，分為四個級別：青海海北地區(qū)、青海果洛地區(qū)和青海玉樹州地區(qū)的蕨麻品質及經(jīng)濟價值高，西藏那曲地區(qū)和西藏林芝地區(qū)的蕨麻品質及經(jīng)濟價值中等，青海黃南海南地區(qū)、青海海東地區(qū)和甘肅南部

4、地區(qū)的蕨麻品質及經(jīng)濟價值一般，青海海西地區(qū)和西藏日喀則地區(qū)的蕨麻品質差，其園藝及生態(tài)價值較高。⑵蕨麻的AFLP分子標記研究青藏高原蕨麻種質資源的遺傳多樣的結果：用熒光標記的PstI/MseI型、HindIII/MseI型和EcoRI/MseI型的三種AFLP分子標記的試劑盒篩選蕨麻種質資源的遺傳多樣性，其中用熒光標記的EcoRI/MseI型AFLP分子標記研究的遺傳多樣性較豐富。用64對引物組合對210份供試材料進行AFLP引物篩選出8

5、對引物組合獲得多態(tài)性高且質量好的AFLP指紋圖譜。8對引物組合共標記出1728條譜帶，其中1581為條多態(tài)帶，147為單態(tài)位點。青海(QH)蕨麻居群的多態(tài)性比率為86.46％，青藏高原蕨麻總的居群（種）的多態(tài)性比率為91.49%>70%；青海(QH)蕨麻居群的平均每個位點的等位基因數(shù)目(A)為1.8646+0.3409，在3個青藏高原蕨麻居群的水平上的平均每個位點的等位基因數(shù)目(A)為1.7184+0.4254，青藏高原蕨麻總的居群（種

6、）的平均每個位點的等位基因數(shù)目(A)為1.9149+0.2770；青海(QH)蕨麻居群和西藏(XZ)蕨麻居群的平均每個位點上等位基因的有效數(shù)目（Ae)為1.2236+0.2843和1.2368+0.3138，在3個青藏高原蕨麻居群的水平上，平均每個位點上等位基因的有效數(shù)目（Ae)為1.2188+0.2981，青藏高原蕨麻總的居群（種）的平均每個位點上等位基因的有效數(shù)目（Ae)為1.2341+0.2910；青海(QH)蕨麻居群和西藏(XZ

7、)蕨麻居群的基因多樣度指數(shù)（H e)為0.1470+0.1558和0.1487+0.1708，在3個青藏高原蕨麻居群的水平上，基因多樣度指數(shù)（H e)為0.1398+0.1631，青藏高原蕨麻總的居群（種）的基因多樣度指數(shù)（H e)為0.1529+0.1582；青海(QH)蕨麻居群的Shannon指數(shù)為0.2441，在3個青藏高原蕨麻居群的水平上的Shannon指數(shù)為0.2274，在種的水平上的種內總遺傳多樣性(Hsp)為0.2533+

8、0.2215，居群內遺傳多樣性(Hpop)為0.2274+0.2326，青藏高原蕨麻居群內遺傳多樣所占比率(%)(Hpop/Hsp)為0.8978，青藏高原蕨麻居群間遺傳多樣性所占比率(%)((Hsp-Hpop)/Hsp)為0.1022。在青藏高原蕨麻居群的種的水平上，蕨麻種內基因多樣性指數(shù)(HT)為0.1490+0.0254較大，蕨麻居群內的基因多樣性指數(shù)(HS)為0.1398+0.0220較大，蕨麻不同居群的基因分化系數(shù)（GST)為

9、0.0617，在總的基因（遺傳）變異中6.17%的變異存在于居群之間，93.83%的變異存在于居群內，總居群的基因流(Nm)為7.7428>1。同一個產(chǎn)地的青藏高原蕨麻種質資源之間的相異系數(shù)存在不同程度的差異。不同產(chǎn)地的青藏高原蕨麻種質資源之間的相異系數(shù)差異程度也不同。用遺傳一致度(I)和遺傳距離(D聚類結果跟用Dice相似系數(shù)聚類結果一致，每個地區(qū)的樣品先聚類在一起，分為三大類，甘肅(GS)和青海(QH)兩個居群首先聚在一起，然后再跟

10、西藏(XZ)蕨麻居群聚在一起，這個結果跟蕨麻三個自然居群的地理位置一致，甘肅(GS)和青海(QH)位于三個居群的東部，西藏(XZ)位于三個居群的西部。
　　結論：用蕨麻的形態(tài)標記和AFLP分子標記分析的上述結果客觀的反映了青藏高原蕨麻種質資源的遺傳多樣性及其地理位置。用形態(tài)標記和AFLP分子標記鑒定出優(yōu)良品質蕨麻及確定了蕨麻種質資源的遺傳多樣。用蕨麻的形態(tài)標記和AFLP分子標記聚類分析結果相同，表明甘肅(GS)和青海(QH)居群親

11、緣關系最近，再跟西藏(XZ)居群親緣關系較近。青藏高原蕨麻種質資源的遺傳多樣性較豐富。青藏高原蕨麻種質資源的同一個產(chǎn)地供試材料之間的相異系數(shù)存在不同程度的差異。不同產(chǎn)地蕨麻種質資源之間的相異系數(shù)差異程度也不同。3個蕨麻居群間有一定的遺傳變異，為6.17%較小，絕大部分的遺傳變異及多樣性集中3個蕨麻居群內部，為93.83%較大。蕨麻總居群內的等位基因的變異較大，蕨麻總居群的基因多樣性較豐富，蕨麻總居群能夠防止基因（遺傳）漂變引起的蕨麻居群