擬南芥中一種有效的耐鹽基因挖掘方法的研究和擬南芥耐氧化突變體OT24-1的篩選和分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、在本論文耐鹽突變體的篩選部分中，我們利用之前本實驗室所構(gòu)建的鹽芥cDNA表達(dá)文庫，在擬南芥中進(jìn)行大規(guī)模的浸花轉(zhuǎn)化，最終得到了125，000株獨立的轉(zhuǎn)基因株系。使用高通量的耐鹽突變體的遺傳篩選方法，我們對這125，000株獨立的轉(zhuǎn)基因株系的后代進(jìn)行了耐鹽篩選。在初次篩選中，我們得到了幾百株可能的耐鹽株系。之后我們對這幾百株可能的耐鹽株系進(jìn)行了復(fù)篩以確認(rèn)其耐鹽性狀。經(jīng)過復(fù)篩，許多耐鹽突變體被分離出來。對這些耐鹽突變()中分離出的cDNA進(jìn)行

2、分析顯示：在擬南芥中過量表達(dá)這些基因時，可以使擬南芥具有耐鹽的性狀。本文主要介紹其中的三個耐鹽突變體ST5-18，ST103-2和ST54-6，其初篩、復(fù)篩的過程和之后的土壤中耐鹽性狀的進(jìn)一步驗證。這種功能基因挖掘的方法或許可以應(yīng)用于其他生物脅迫(抗病基因)和非生物脅迫下抗性基因的分離。 我們采用生產(chǎn)超氧化物(superoxide)的paraquat為抗氧化突變體的選擇劑，對一個55，000獨立轉(zhuǎn)化株系的擬南芥激活突變體庫進(jìn)行篩

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