具有pH響應(yīng)及細(xì)胞核靶向功能的聚合物膠束在癌癥治療中的研究.pdf

1、近年來(lái)，利用納米載體對(duì)癌癥進(jìn)行靶向治療，在抗癌治療研究中受到了廣泛的關(guān)注。為了提高化療藥物的抗癌效果以及減少其對(duì)系統(tǒng)的毒副作用，增加腫瘤細(xì)胞對(duì)納米顆粒的攝取和實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核藥物傳遞顯得尤為重要?？紤]利用細(xì)胞穿透肽(CPP)修飾具有刺激響應(yīng)性的納米載體，不僅能達(dá)到腫瘤靶向的目的，還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞大量攝取納米顆粒，從而有效抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖。
　　在本論文中第二章，我們成功合成了具有細(xì)胞穿透肽兼細(xì)胞核定位信號(hào)Tat修飾的pH響應(yīng)性聚合物D

2、A-Tat-PEG-PCL(DA-Tat-PECL)。為了改善廣譜抗癌藥物10-羥基喜樹堿(HCPT)的疏水性，提高載藥量(LC)和載藥效率(EE)，我們把HCPT接枝在甲氧基聚乙二醇(mPEG)上，成功合成了改性藥物mPEG-HCPT。我們通過(guò)核磁共振氫譜(1HNMR)，凝膠滲透色譜(GPC)，紅外光譜(FT-IR)和高效液相色譜(HPLC)驗(yàn)證了共聚物結(jié)構(gòu)的正確性。通過(guò)溶劑揮發(fā)法，我們制備出具有細(xì)胞核靶向和pH響應(yīng)性的膠束PECL/

3、DA-Tat-M，該膠束具有較低的臨界膠束濃度(CMC)，熱力學(xué)穩(wěn)定性良好，且具備核殼結(jié)構(gòu)，能有效包載疏水性藥物。納米激光粒度儀DLS和透射電鏡TEM的結(jié)果顯示，該膠束呈均—球形，粒徑在80nm左右。體外模擬藥物釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:包載mPEG-HCPT的膠束的釋藥速率比包載HCPT的膠束的釋藥速率快，且膠束的LC和EE分別在5％和70％以上。膠束的pH響應(yīng)性考察結(jié)果顯示，在pH6.8條件下，二甲基馬來(lái)酸酐(DA)與Tat之間的酰胺鍵迅速

4、斷裂，Tat完全暴露，使膠束發(fā)生電荷反轉(zhuǎn)，表面電荷由負(fù)變正，且粒徑也增大到90 nm左右。
　　在第三章中，對(duì)該電荷反轉(zhuǎn)膠束PECL/DA-Tat-M進(jìn)行了一系列體外生物學(xué)評(píng)價(jià)，結(jié)果表明PECL/DA-Tat-blank M空白膠束具有良好的生物相容性，載入mPEG-HCPT后能抑制腫瘤細(xì)胞，且在pH6.8時(shí)具有最低的IC50值。我們發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞對(duì)該膠束的的攝取，以及亞細(xì)胞定位均受到pH的影響，在pH6.8時(shí)，該膠束被腫瘤細(xì)胞大

5、量攝取，進(jìn)入細(xì)胞后能有效富集在細(xì)胞核周圍，藥物釋放后順利進(jìn)入細(xì)胞核，這些結(jié)果均表明，在弱酸性環(huán)境下，DA從共聚物上脫落，Tat暴露出來(lái)，促進(jìn)了細(xì)胞的內(nèi)吞作用，進(jìn)入細(xì)胞后，Tat發(fā)揮細(xì)胞核定位的作用，使膠束實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核靶向功能。
　　在第四章，建立了4T1小鼠乳腺癌原位模型和異位模型，用于驗(yàn)證該膠束的體內(nèi)抗腫瘤效果的研究。結(jié)果顯示與對(duì)照組，空白膠束組，HCPT組，mPEG-HCPT組合PECL-M膠束組相比，PECL/DA-Tat-M