黃曲霉毒素B-,1-間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法的建立與單克隆抗體免疫親和柱的初步研制.pdf

1、分類號(hào)UDC密級(jí)編號(hào)學(xué)位論文蕙些重垂苤曼】間接壺塋量Ll曼△拴到左選趁建童生望直隆埴簽魚壅苤麴掛盥墊生班趔指導(dǎo)教師姓名盜揚(yáng)熬援(擅塑直昌盔堂生焦壁金嬰塞瞳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別姓專業(yè)名稱邀生塹堂論文提交日期2QQ5生曼且論文答辯日期2QQ量生亙且學(xué)位授予單位和日期直昌盔堂2QQ量生目目答辯委員會(huì)主席衄土勤評(píng)閱人值勤越勇堡2005年6月謄黃曲霉毒素Bl間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法的建立與單克隆抗體免疫親和柱的初步研制摘要黃曲霉毒素B1(Aflatox

2、inB1，AFBl)是由某些真菌菌株產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。由于其具有極強(qiáng)的毒性、致癌性以及在自然界存在的普遍性，許多國(guó)家規(guī)定了其在各類糧食、食品和飼料中的限量標(biāo)準(zhǔn)。在食物中要避免AFB，含量超標(biāo)，除了在農(nóng)作物種植、儲(chǔ)存、加工等各環(huán)節(jié)科學(xué)作業(yè)外，最有效的方法是加強(qiáng)對(duì)整個(gè)操作環(huán)節(jié)的檢測(cè)監(jiān)控，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和剔除受污染的產(chǎn)品，防止AFBl含量超標(biāo)的產(chǎn)品進(jìn)入人類食物鏈。因此研究準(zhǔn)確、靈敏、快速的AFB，檢測(cè)方法具有重要意義。本研究主要內(nèi)容包括：AFB。

3、人工抗原的制備，AFB，間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法的建立，以及AFB。單克隆抗體免疫親和柱的研制。在AFBl人工抗原制各的第一步肟化反應(yīng)中，用室溫肟化法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的加熱回流法，使肟化率達(dá)到95％；在第二步EDC法制備AFBl肟化物與載體蛋白的偶聯(lián)物時(shí)，采用修飾的牛血清白蛋白(MBSA)，避免了EDC引起的蛋白質(zhì)自身交聯(lián)問題。并在制備過(guò)程中通過(guò)TLC與ELISA方法對(duì)反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)控，確定了最佳的肟化反應(yīng)時(shí)間與偶聯(lián)反應(yīng)時(shí)間，并就AFB。與MBS