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文檔簡介
1、Jessen等人就證實GABA不僅存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng),還廣泛的分布在胃腸道等外周神經(jīng)系統(tǒng)中[1]。有研究表明GABA對大鼠,豚鼠,貓和狗等動物消化道平滑肌自主收縮活動產(chǎn)生影響,其作用效果因動物的種類和胃腸的部位不同而不同。產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因可能是GABA的受體分布不同或?qū)Ψ悄I上腺能非膽堿能神經(jīng)作用的緣故,但確切的原因還不十分明確。但GABA在小鼠回腸內(nèi)的分布及對小鼠平滑肌自主收縮的作用影響的研究尚未見報道。本實驗運用免疫組織化學(xué)的方法檢
2、查了GABA在小鼠回腸的分布;以小鼠回腸肌條收縮幅度變化為指標(biāo),觀察了GABA對小鼠回腸肌條自主收縮的抑制作用以及一氧化氮合酶(NOS)抑制劑L-NNA,可溶性鳥苷酸環(huán)化酶(sGC)抑制劑ODQ,β-受體抑制劑普萘洛爾(Propranolol)對GABA抑制作用的影響。初步討論了GABA對小鼠回腸自主收縮作用時與NO,cGMP和β-受體的相互關(guān)系。 實驗結(jié)果: 1.小鼠回腸粘膜層及粘摸下層也有GABA陽性細胞和纖維分
3、布;平滑肌肌層可見GABA免疫反應(yīng)陽性。 2.GABA(1×10-6~1×10-3mol/L)抑制了小鼠回腸平滑肌自主收縮幅度。各濃度GABA的幅度與對照組均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05,n=10)。其中1×10-6mol/LGABA幅度抑制百分率達(34.7±7.4)%。 3.GABAA受體的抑制劑picrotoxin(3×10-5mol/L)孵育標(biāo)本后,各濃度的GABA的抑制作用沒有改變(P>0.05,n=7)。
4、 4.NOS抑制劑L-NNA(1×10-5mol/L孵育標(biāo)本后,再加入GABA(1×10-6mol/L)后,幅度抑制百分率為(15.9±3.8)%,比單獨同濃度的GABA的抑制百分率下降,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,n=6)。 5.預(yù)先用可溶性鳥苷酸環(huán)化酶(sGC)抑制劑ODQ(1×10-6mol/L)孵育小鼠回腸肌條15min后,再加入GABA(1×10-6mol/L),其收縮幅度為(0.34±0.05)g與未加
5、藥前自主收縮(0.35±0.05)g幅度相比,沒有明顯差別(p>0.05,n=5)。與單獨加入1×10-6mol/LGABA相比,其抑制百分率由(33.2±7.3)%下降到(4.8±1.3)%,兩者相比差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01,n=5)。 6.用L-Arg(5×10-7mol/L)孵育標(biāo)本15min,1×10-6mol/LGABA幅度抑制百分率僅為(7.1±1.8)%,與單獨同濃度的GABA幅度抑制百分率(35.1±
6、7.3)%相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01,n=6)。1×10-3mol/LGABA在加入L-Arg后幅度抑制百分率與單獨同濃度的GABA幅度抑制百分率相比,差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05,n=6)。 7.用propranolol(3×10-6mol/L)孵育標(biāo)本15min,再加入1×10-6mol/LGABA,其幅度抑制百分率為(14.6±2.6)%,與單獨同濃度的GABA幅度抑制百分率(34.4±7.2)%相比,幅度
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