荷葉生物堿舒張小鼠氣管平滑肌的作用機(jī)理.pdf

1、哮喘是一種以可逆性氣流受限為特征的氣道慢性炎癥性疾病，以氣管平滑肌細(xì)胞的收縮增強(qiáng)和氣道的興奮性應(yīng)答為主要病理特征，嚴(yán)重威脅著人類健康。荷葉是一種傳統(tǒng)的中草藥，目前研究表明其具有清熱解毒、降血壓降血脂、抑菌抗病毒等多種生物學(xué)活性，使其在全世界被廣泛使用。但荷葉是否對(duì)氣管平滑肌功能具有調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制尚不清楚。因此，我們以荷葉生物堿提取物（alkaloids extracts of lotus leaves, AELL）作為研究對(duì)象，探究該

2、提取物在氣管平滑肌上的效果及作用機(jī)制。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴選擇80mM KCl作為激動(dòng)劑，引起小鼠氣管環(huán)預(yù)收縮。我們將0.316 mg/mL~17.8 mg/mL的AELL作用于被預(yù)收縮的氣管環(huán)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：AELL能夠部分舒張被高K+預(yù)收縮的氣管平滑肌，并且呈劑量依賴性。因?yàn)闅夤芷交〉氖湛s和舒張與細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度有關(guān)，所以我們又通過無鈣和生理鈣溶液的轉(zhuǎn)換實(shí)驗(yàn)證明其機(jī)制是AELL阻斷了由高K+引起的外鈣內(nèi)流。進(jìn)而膜片鉗實(shí)驗(yàn)

3、發(fā)現(xiàn)AELL還可以阻斷電壓依賴性的L-型鈣通道（VDLCCs）介導(dǎo)的鈣電流。⑵選擇100μM ACh作為激動(dòng)劑，引起小鼠氣管環(huán)預(yù)收縮。用0.001 mg/mL~100 mg/mL的AELL作用于被預(yù)收縮的氣管環(huán)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：AELL能夠部分舒張被ACh預(yù)收縮的氣管平滑肌，并且呈劑量依賴性。因?yàn)锳Ch可以激活 VDLCCs和非選擇性陽離子通道（NCCCs）兩種通道，所以接下來的實(shí)驗(yàn)是在排除了VDLCCs的條件下進(jìn)行的。我們用VDLCCs的特

4、異性阻斷劑硝苯地平阻斷VDLCCs，通過無鈣和生理鈣溶液的轉(zhuǎn)換實(shí)驗(yàn)證明其機(jī)制是AELL阻斷了由 ACh引起的外鈣內(nèi)流。同樣為了驗(yàn)證我們已經(jīng)得到的結(jié)果，我們又通過了膜片鉗實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AELL還可以阻斷NSCCs介導(dǎo)的鈣電流。⑶用nuciferine開展了與上述同樣的實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示：nuciferine可以完全舒張由高K+預(yù)收縮的氣管平滑肌，以及絕大部分地舒張由ACh預(yù)收縮的氣管平滑肌，這種舒張效果也是呈劑量依賴性的。舒張機(jī)制是阻斷由K+和AC