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文檔簡介
1、刺葡萄是廣西羅城野生葡萄之一,本研究以此為材料,主要研究其單芽莖段離體培養(yǎng)和葉片愈傷組織誘導(dǎo)與分化。結(jié)果表明: (一)莖段離體培養(yǎng)。1.外植體的滅菌方式:用0.1%升汞效果較好;2.外植體的最佳取材方法:采用休眠枝沙培于干凈的培養(yǎng)室,取其萌枝;3.基本培養(yǎng)基:1/2MS 和B5 培養(yǎng)基都可用;4.細(xì)胞分裂素6-BA 和KT 易引起刺葡萄褐變死亡,不宜使用這兩者于該葡萄的組織培養(yǎng);5.初代培養(yǎng)ZT濃度為1.0-2.0 mg/L配合
2、低濃度的生長素NAA0.01-0.05 mg/L對腋芽的誘導(dǎo)效果最好;6.繼代培養(yǎng):本實(shí)驗(yàn)中該葡萄沒有產(chǎn)生叢生芽,培養(yǎng)基配方以B5+ZT1.0 mg/L+IAA0.01 mg/L最好,芽苗粗壯,繁殖倍數(shù)最高,達(dá)到2.01;7.生根培養(yǎng):該葡萄易誘導(dǎo)生根,最佳培養(yǎng)基配方為1/2MS+ IBA0.5 mg/L,生根率達(dá)100%。 (二)葉片愈傷組織的誘導(dǎo)與分化。1.刺葡萄葉片再生植株難以獲得,本試驗(yàn)未能從葉片誘導(dǎo)出再生植株。2.葉片
3、愈傷組織容易誘導(dǎo)。單獨(dú)使用生長素NAA、IBA 或細(xì)胞分裂素ZT 都能從葉片誘導(dǎo)出愈傷組織。以細(xì)胞分裂素ZT 與生長素NAA 搭配使用誘導(dǎo)效果最好,誘導(dǎo)率高達(dá)100%。最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為1/2B5+ZT1.0 mg/L +NAA0.01 mg/L,愈傷組織呈顆粒狀,致密。此外,使用生長素NAA 或IBA 容易誘導(dǎo)葉片分化不定根,生長素在0-1.0 mg/L 時,濃度越高生根率越高。3.葉片愈傷組織的繼代培養(yǎng):使用ZT 1.0-2.0
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