墨西哥落羽杉組織培養(yǎng)的研究.pdf

1、該研究以墨西哥落羽杉為對(duì)象,進(jìn)行了體細(xì)胞胚胎發(fā)生和植株再生、器官發(fā)生和植株再生、試管無(wú)性系快速繁殖等方面的研究,主要結(jié)果如下:1.以墨西哥落羽杉(Taxodium mucronatum)種子萌發(fā)后的下胚軸和子葉為外植體,進(jìn)行墨西哥落羽杉直接體細(xì)胞胚胎發(fā)生的研究.結(jié)果表明:子葉外植體未能誘導(dǎo)出體細(xì)胞胚,與子葉相比,下胚軸更有利于體細(xì)胞胚胎的發(fā)生,但下胚軸培養(yǎng)時(shí)間的長(zhǎng)短也直接影響體細(xì)胞胚胎發(fā)生頻率.取種子萌發(fā)、子葉展開一周后的下胚軸在DCR

2、+BA2.0mg/l+IBA0.1 mg/l的培養(yǎng)基上直接體細(xì)胞胚發(fā)生頻率可達(dá)24.5％.誘導(dǎo)出的體細(xì)胞胚及時(shí)轉(zhuǎn)入不添加任何激素的DCR基本培養(yǎng)基中以促進(jìn)其萌發(fā).2.以墨西哥落羽杉種子萌發(fā)后的下胚軸和子葉為外植體,進(jìn)行器官發(fā)生的研究.結(jié)果表明:子葉未能誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽.下胚軸在DCR+BA2.0mg/l+IBA0.1 mg/l+TDZ0.01 mg/l的培養(yǎng)基上不定芽誘導(dǎo)頻率為58.5％,低濃度的TDZ與BA配合使用有利于下胚軸不定芽的誘

3、導(dǎo)與分化.誘導(dǎo)出的不定芽繼代在不添加任何激素的DCR基本培養(yǎng)基中伸長(zhǎng)培養(yǎng),在不添加任何激素的1/2DCR基本培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo),生根誘導(dǎo)率可達(dá)70％以上.3.通過(guò)幼苗和腋芽?jī)煞N不同外植體來(lái)建立墨西哥落羽杉試管無(wú)性系.結(jié)果表明:幼苗在DCR+BA0.5mg/l+IBA0.2mg/l培養(yǎng)基上誘導(dǎo)分化效果最好,分化頻率80％以上,平均每個(gè)外植體產(chǎn)芽2-5個(gè).誘導(dǎo)出針葉基潛伏芽后,轉(zhuǎn)入DCR+500mg/1Gln中伸長(zhǎng)生長(zhǎng).Gln能夠促進(jìn)針葉

4、基潛伏芽的伸長(zhǎng)生長(zhǎng).試管苗在3/4DCR+0.05％AC培養(yǎng)基中生根效果最好,生根率可達(dá)78％.選擇節(jié)間較長(zhǎng),生長(zhǎng)旺盛,莖干較粗壯的小苗誘導(dǎo)生根過(guò)程往往容易完成.根長(zhǎng)達(dá)2-4cm時(shí),開瓶煉苗3-7天后即可進(jìn)行移栽.4.DCR+IBA0.05mg/l+BA0.025mg/l培養(yǎng)基最有利于莖段腋芽的抽梢與伸長(zhǎng)生長(zhǎng).腋芽針葉基潛伏芽的誘導(dǎo)以DCR+BA0.3mg/l+NAA0.1mg/l+Gln500mg/l培養(yǎng)基為最佳,加入Gln可明顯提高