蠟狀芽孢桿菌S-12-86產(chǎn)海洋溶菌酶的研究.pdf

1、通過(guò)添加金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的平板,從東海海泥中篩選出一株產(chǎn)溶菌酶能力較高的細(xì)菌菌株S-12,其產(chǎn)生的溶菌酶對(duì)卵清溶菌酶不能作用的多種致病菌有較強(qiáng)的溶解活性,溶菌譜廣泛.對(duì)它的形態(tài)特征、培養(yǎng)特性進(jìn)行了觀察,結(jié)合16SrDNA全序列分析,將該菌株鑒定為蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)以蠟狀芽孢桿菌S-12為出發(fā)菌,在原生質(zhì)體形成和再生的最佳條件下制備原生質(zhì)體,對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行紫外、亞硝基

2、胍復(fù)合誘變,對(duì)大量再生突變株進(jìn)行篩選,最終獲得了高產(chǎn)、穩(wěn)定的溶菌酶產(chǎn)生菌株S-12-86,在非海水而是自來(lái)水配制的培養(yǎng)基中就能夠大量產(chǎn)酶,產(chǎn)酶活力為270U/ml.從而解決了蠟狀芽孢桿菌S-12-86低溫溶菌酶大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)業(yè)化區(qū)域的局限性.以產(chǎn)低溫溶菌酶的蠟狀芽孢桿菌S-12突變株S-12-86為培養(yǎng)菌株,進(jìn)行碳源、氮源、起始pH值、培養(yǎng)時(shí)間、接種量和接種齡等發(fā)酵條件的優(yōu)化實(shí)驗(yàn).實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明在以糊精2﹪、花生粕2﹪為碳源,以

3、NH<,4>CL 1﹪、(NH<,4>)<,2>SO<,4> 1﹪.為氮源,起始pH值7,接種20h種齡的種子6﹪,25℃、250r/min的條件下在旋轉(zhuǎn)搖床中培養(yǎng)27h,菌株產(chǎn)酶活性最高.論述了護(hù)膚化妝品中海洋溶菌酶的理化性質(zhì)、防腐效果及其與常規(guī)護(hù)膚化妝品主要原料、表面活性劑的配伍性.該酶對(duì)溶壁微球菌的最適作用溫度為35℃,最適作用pH為8,在低溫條件下還能保持較高活性,且廣譜殺菌,對(duì)常見(jiàn)細(xì)菌、真菌均有作用.酶的抑制性實(shí)驗(yàn)和配伍性實(shí)驗(yàn)