不同冷凍消融時間對兔氣管肉芽組織增生的影響及其作用機制.pdf

1、目的:本實驗采用尼龍刷刷擦局部氣管環(huán)部建立氣管上皮損傷后肉芽組織增生的模型，探討不同冷凍消融時間對氣道肉芽組織增生的影響及其作用機制，為臨床上選擇最佳冷凍治療時間提供理論依據(jù)。
　　方法:從40只新西蘭大白兔中按隨機數(shù)字表法選出8只兔作為假手術(shù)組（S組），剩余為模型對照組。其中，S組只予氣管橫切，模型對照組則氣管切開后用尼龍刷刷擦局部氣管環(huán)部建立兔氣道狹窄模型。建模成功后，根據(jù)隨機數(shù)字表法將32只模型兔平均分為M組、冷凍30sec

2、組（A組）、冷凍1min組（B組）和冷凍2min組（C組），分別對A組、B組、C組行30sec、1min、2min冷凍消融治療。治療后1周收集所有兔氣管標(biāo)本，蘇木精-伊紅染色(HE)后在光學(xué)顯微鏡下測量氣管黏膜下層厚度，免疫組織化學(xué)染色法檢測氣管轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)的表達變化;逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)檢測TGF-β1、白細胞介素6（IL-6）及CD34的表達變化。
　　結(jié)果:
　　(1)S組、M組、A

3、組、B組、C組氣管黏膜下層厚度分別為（0.20±0.07）mm、（0.77±0.28）mm、（0.44±0.13）mm、（0.87±0.10）mm、（0.55±0.18）mm，由結(jié)果可知，M組氣管黏膜下層厚度明顯大于S組、A組與C組(P＜0.05)，B組與M組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，在冷凍治療組中，A組黏膜下層厚度明顯低于B組和C組，且B組的氣管黏膜下層厚度最高，A組、B組與C組任意兩組之間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05

4、）。
　　(2)S組、M組、A組、B組、C組氣管肉芽組織TGF-β1的平均光密度值分別為0.42±0.01、0.50±0.01、0.43±0.01、0.49±0.01、0.48±0.01，M組TGF-β1的表達明顯高于S組、A組、C組（P＜0.05），A組TGF-β1的表達明顯低于B組、C組(P＜0.05)，B組與M組之間、B組與C組之間TGF-β1的表達差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(3)S、M、A、B、C組T

5、GF-β1 mRNA表達量分別為0.85±0.12、6.45±0.31、2.38±0.10、18.19±0.73、12.61±2.14; IL-6 mRNA表達量分別為0.84±0.09、3.89±0.31、1.08±0.10、2.68±0.11、1.24±0.17;CD34 mRNA表達量分別為1.16±0.16、7.37±0.69、2.09±0.10、12.72±0.96、4.92±0.90;根據(jù)結(jié)果可知，M組TGF-β1、IL-6

6、和CD34的mRNA表達均
　　(4)明顯高于S組、A組、C組(P＜0.05);M組IL-6的mRNA表達明顯高于B組(P＜0.05)，但M組TGF-β1和CD34的mRNA表達明顯低于B組(P＜0.05);A組CD34、TGF-β1的mRNA表達明顯低于C組(P＜0.05)，而A組與C組IL-6的mRNA表達之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);B組TGF-β1、IL-6和CD34的mRNA表達均高于A組和C組(P＜0.05)。