液氮冷凍法制備兔股骨頭壞死模型新方法及效果評估.pdf

1、股骨頭壞死是骨科常見疾病之一，雖然股骨頭壞死的治療方法很多，但是目前的研究尚未發(fā)現(xiàn)一種可以修復(fù)或者治愈股骨頭壞死的方法。隨著病程的進(jìn)展，壞死的股骨頭最終會發(fā)生塌陷，患者不得不接受髖關(guān)節(jié)置換手術(shù)。目前股骨頭壞死的發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，雖然國內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量深入的研究，并提出了很多學(xué)說，但均未取得突破性進(jìn)展。究其原因，其中之一可歸咎于缺少一種可以模擬人類股骨頭壞死病理變化過程的動物模型。
　　目的：
　　通過改良的手術(shù)路徑，應(yīng)

2、用液氮冷凍法制備兔股骨頭壞死模型，建立一種模擬人類股骨頭壞死病理變化過程的實驗動物模型，為股骨頭壞死的基礎(chǔ)研究奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　選取10只健康雌性新西蘭大白兔，月齡3.0±0.2，體重3.2±0.4Kg，選取左側(cè)股骨頭為實驗組，右側(cè)股骨頭為空白對照。耳緣靜脈麻醉后固定實驗動物，取髖關(guān)節(jié)外側(cè)切口，逐層分離皮下筋膜、肌肉暴露股骨近端，選取進(jìn)針點(diǎn)并以合適前傾角、外展角以及深度沿股骨頸方向鉆入2.0mm克氏針，將液氮冷凍儀

3、探針插入孔道進(jìn)入股骨頭區(qū)域，對股骨頭進(jìn)行冷凍——復(fù)溫2個循環(huán)，冷凍、復(fù)溫時間均為半分鐘，縫合切口后放回原籠位。于術(shù)后4周取出股骨頭觀察股骨頭形態(tài)、顏色等變化，并即刻行股骨頭X線、micro-CT和MRI檢查，最后行組織病理切片檢查。
　　結(jié)果：
　　所有實驗動物術(shù)后均無死亡。通過對實驗兔雙側(cè)股骨頭大體形態(tài)觀察，實驗組股骨頭軟骨下骨顏色變深，呈暗紅色，負(fù)重區(qū)有小片狀壞死灶。X線結(jié)果示實驗組軟骨下骨小梁排列紊亂，但無明顯的骨質(zhì)密

4、度改變。micro-CT示實驗組股骨頭軟骨下骨小梁稀疏、紊亂，出現(xiàn)多處骨小梁連續(xù)性中斷。MRI示實驗組股骨頭表現(xiàn)為以高信號為主的片狀的高、低混合信號區(qū)。病理組織切片結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)軟骨變薄、細(xì)胞排列紊亂，骨小梁變細(xì)、排列紊亂，脂肪細(xì)胞融合，空骨陷窩形成等。10只實驗兔的左側(cè)股骨頭均出現(xiàn)早期壞死的表現(xiàn)，成功率100％。
　　結(jié)論：
　　本實驗通過新的手術(shù)路徑用液氮冷凍法成功制備了兔股骨頭壞死的模型，手術(shù)創(chuàng)傷小，無需切開關(guān)節(jié)囊和脫位