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文檔簡介
1、目的:通過實驗研究深低溫冷凍不同復溫方法下兔肢體再植后血管形態(tài)學變化,找出一種對復合組織中血管損傷最小的復溫方法,從而為深低溫處理后斷肢再植可行性提供理論依據(jù)。
方法:取健康新西蘭大白兔30只,隨機分為空白對照組(A組)、慢速冷凍-慢速復溫組(B組)、慢速冷凍-快速復溫組(C組)。均給予大白兔右后肢自膝上1cm處離斷。A組不進行任何處理,所有深低溫處理組均給予凍存保護劑灌注和保護。慢速冷凍慢速復溫組采用梯度化冷凍復溫處理斷肢,
2、慢速冷凍快速復溫組采用梯度化冷凍斷肢后直接放入37℃水浴快速復溫。B組、C組復溫后均行斷肢再植,再植肢體成活6小時后給予再次離斷右后下肢。A、B、C三組兔斷肢均取股血管組織采用染色光鏡及電鏡進行形態(tài)學觀察及大體觀察,光鏡病理計分結果用統(tǒng)計學分析。
結果:
?。?)大體觀察:B組血管較冷凍-復溫處理前管徑略增粗,管壁結構完整,無分層及血栓形成,通血后肢體輕度水腫,末梢血運良好;C組2例血管結構紊亂,管腔塌陷,修剪外膜后管
3、壁結構欠佳,未能完成再植,3例出現(xiàn)管腔分層現(xiàn)象,余血管均較冷凍-復溫處理前管徑增粗,管壁結構尚完整,無分層及血栓形成,通血后肢體水腫明顯,末梢血運尚可。
?。?)光鏡下形態(tài)學檢測結果:A組:內皮細胞連續(xù)性好,排列規(guī)則有序,內皮下層內彈力膜結構正常,中層平滑肌細胞核清晰,結構正常,個別出現(xiàn)內皮細胞點狀脫落,余結構正常;B組:內皮細胞存在少量脫失,部分內皮細胞排列欠規(guī)則,偶見內彈力膜斷裂,平滑肌細胞結構良好,血管整體結構良好;C組:
4、內皮細胞片狀脫落,內皮層與內皮下層可見多處空隙,內彈力膜、中層平滑肌偶見斷裂,管壁結構欠佳。
?。?)透射電鏡觀察內皮細胞結果:A組:內皮細胞結構完好,細胞器形態(tài)良好,細胞核結構清晰,無皺縮,細胞連接完好,與彈力內膜附著緊密;B組:內皮細胞結構欠佳,細胞皺縮,細胞器結構紊亂,少部分空泡化,細胞間連接消失,與內彈力膜間產生空隙,部分脫離,甚至脫落至管腔內;C組:內皮細胞大量脫落,結構欠完整,內彈力膜連續(xù)性欠完整,線粒體腫脹,嵴消失
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