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1、目的:通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究深低溫冷凍不同復(fù)溫方法下兔肢體再植后血管形態(tài)學(xué)變化,找出一種對(duì)復(fù)合組織中血管損傷最小的復(fù)溫方法,從而為深低溫處理后斷肢再植可行性提供理論依據(jù)。
方法:取健康新西蘭大白兔30只,隨機(jī)分為空白對(duì)照組(A組)、慢速冷凍-慢速?gòu)?fù)溫組(B組)、慢速冷凍-快速?gòu)?fù)溫組(C組)。均給予大白兔右后肢自膝上1cm處離斷。A組不進(jìn)行任何處理,所有深低溫處理組均給予凍存保護(hù)劑灌注和保護(hù)。慢速冷凍慢速?gòu)?fù)溫組采用梯度化冷凍復(fù)溫處理斷肢,
2、慢速冷凍快速?gòu)?fù)溫組采用梯度化冷凍斷肢后直接放入37℃水浴快速?gòu)?fù)溫。B組、C組復(fù)溫后均行斷肢再植,再植肢體成活6小時(shí)后給予再次離斷右后下肢。A、B、C三組兔斷肢均取股血管組織采用染色光鏡及電鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察及大體觀察,光鏡病理計(jì)分結(jié)果用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:
(1)大體觀察:B組血管較冷凍-復(fù)溫處理前管徑略增粗,管壁結(jié)構(gòu)完整,無(wú)分層及血栓形成,通血后肢體輕度水腫,末梢血運(yùn)良好;C組2例血管結(jié)構(gòu)紊亂,管腔塌陷,修剪外膜后管
3、壁結(jié)構(gòu)欠佳,未能完成再植,3例出現(xiàn)管腔分層現(xiàn)象,余血管均較冷凍-復(fù)溫處理前管徑增粗,管壁結(jié)構(gòu)尚完整,無(wú)分層及血栓形成,通血后肢體水腫明顯,末梢血運(yùn)尚可。
(2)光鏡下形態(tài)學(xué)檢測(cè)結(jié)果:A組:內(nèi)皮細(xì)胞連續(xù)性好,排列規(guī)則有序,內(nèi)皮下層內(nèi)彈力膜結(jié)構(gòu)正常,中層平滑肌細(xì)胞核清晰,結(jié)構(gòu)正常,個(gè)別出現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞點(diǎn)狀脫落,余結(jié)構(gòu)正常;B組:內(nèi)皮細(xì)胞存在少量脫失,部分內(nèi)皮細(xì)胞排列欠規(guī)則,偶見(jiàn)內(nèi)彈力膜斷裂,平滑肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)良好,血管整體結(jié)構(gòu)良好;C組:
4、內(nèi)皮細(xì)胞片狀脫落,內(nèi)皮層與內(nèi)皮下層可見(jiàn)多處空隙,內(nèi)彈力膜、中層平滑肌偶見(jiàn)斷裂,管壁結(jié)構(gòu)欠佳。
?。?)透射電鏡觀察內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)果:A組:內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完好,細(xì)胞器形態(tài)良好,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰,無(wú)皺縮,細(xì)胞連接完好,與彈力內(nèi)膜附著緊密;B組:內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)欠佳,細(xì)胞皺縮,細(xì)胞器結(jié)構(gòu)紊亂,少部分空泡化,細(xì)胞間連接消失,與內(nèi)彈力膜間產(chǎn)生空隙,部分脫離,甚至脫落至管腔內(nèi);C組:內(nèi)皮細(xì)胞大量脫落,結(jié)構(gòu)欠完整,內(nèi)彈力膜連續(xù)性欠完整,線粒體腫脹,嵴消失
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