Ⅰ型膠原的提取及其組裝和表征.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、膠原蛋白,簡稱膠原,是細胞外基質的主要結構蛋白,是結締組織的主要成份之一。它廣泛存在于動物的皮、骨、肌腱、韌帶、血管中,約占哺乳動物總蛋白的1/3。膠原蛋白以其良好的生物相容性、生物可降解性和弱抗原性,在藥物釋放和組織工程領域得到了廣泛地應用。 本文是以不同種屬的動物皮膚為基本原料,通過酸溶法-醋酸萃取提取了鯊魚(Carcharodoncarcharias)、牛蛙(Rana catesbeiana)、鵪鶉(Coturnix co

2、turnix)、青魚(Potamalosa richmondia)四種動物的I型膠原。用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析提取的膠原,與標準分子量蛋白比較得到:這四種膠原的肽鏈組成均為α<,1>(I)<,2>α<,2>(I),與I型膠原的肽鏈組成相一致;分別測量提取的膠原的特征吸收峰,結果顯示:這四種膠原的最高吸收峰均在225±5nm,與文獻報道的膠原的特征吸收峰位置相符。用考馬斯亮藍染色法測定四種膠原的濃度,結果顯示:鯊魚皮膚膠原的提取率

3、相對最高,鵪鶉皮膚膠原的提取率相對最低。 以這四種膠原提取液為母液,使用真空冷凍干燥法,得到相應的膠原海綿。這四種膠原海綿外觀相似,色澤白或微黃,質地均勻,結構較為疏松,肉眼可見許多大小不一的孔隙;進一步對其含水量、潤濕時間、吸水量、吸水率等物理性能進行測定,數據表明膠原海綿親水性好,吸水率較大。用紫外燈照射鯊魚膠原海綿,促使其膠原分子中酪氨酸和苯丙氨酸的交聯(lián),得到的膠原支架材料呈現立體的網狀結構。 設計使用透析法制備

4、了膠原水凝膠膜,即對飽和的鯊魚、牛蛙膠原提取液,通過透析、載玻片壓平制備成膠原水凝膠膜。與電紡絲法制備納米級膠原膜相比,此方法簡便易行,無需復雜的儀器設備。螺旋測微器測量膠原水凝膠膜的厚度,在飽和狀態(tài)下得到的鯊魚膠原水凝膠膜為0.210±0.040mm、牛蛙膠原水凝膠膜為0.070±0.015 mm。對鯊魚膠原水凝膠膜進行SEM和AFM表征,從SEM圖像中能夠清楚地看到膠原纖維,彼此緊密交聯(lián),每根膠原纖維由相互纏繞的三股螺旋形成;AFM

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