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文檔簡介
1、目的:觀察電針“頸夾脊”穴、“手三里”穴對大鼠退變椎間盤軟骨細胞炎癥因子及IKKβ/NF-κB信號通路中IKKβ、NF-κB p65表達的影響,探討電針介導(dǎo)IKKβ/NF-κB信號通路在延緩椎間盤退變過程中的作用機制。
方法:將40只SD大鼠,雌雄各半,購回后適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,采用隨機數(shù)字表法分為假手術(shù)對照組(簡稱假手術(shù)組)10只,造模組30只。假手術(shù)組僅將皮膚切開而不切斷肌肉組織;造模組參照動靜力失衡性頸椎間盤退變的造模方法進
2、行造模。造模后常規(guī)飼養(yǎng)3個月,采用甲苯胺藍染色法觀察頸椎間盤組織形態(tài)學(xué)的改變確定造模成功。將造模組大鼠按隨機數(shù)字表法分為模型對照組(簡稱模型組)、模型電針治療組(簡稱電針組)、模型美洛昔康片治療組(簡稱美洛昔康組),每組8只。電針組將大鼠固定于自制大鼠固定器上,針刺同側(cè)“頸夾脊”穴約4mm、“手三里”穴約4mm,連接華佗牌電針儀,將電流輸入的負極接在大鼠的頸夾脊穴,正極連接接在大鼠的手三里穴,疏密波,頻率2/100 Hz,電流1mA,以
3、大鼠局部肌肉有一定幅度振顫為宜,每次干預(yù)25 min,每天1次,14d為1個療程,2療程之間間隔2d,共治療2個療程;美洛昔康組給予美洛昔康片每日0.7878 mg/kg灌胃干預(yù),治療療程與電針組相同;假手術(shù)組和模型組只做固定而不做治療處理,其固定的時間同電針組。治療結(jié)束后取椎間盤,采用免疫組織化學(xué)法檢測軟骨細胞內(nèi)TNF-α、IL-6的表達,采用Western blot半定量檢測法檢測軟骨細胞內(nèi)NF-κB p65、 IKKβ蛋白的表達水
4、平。
結(jié)果:(1)甲苯胺藍染色:假手術(shù)組中軟骨終板呈現(xiàn)深藍紫色,且終板厚度較厚,軟骨細胞數(shù)目多。模型組中軟骨終板染色較淡,其軟骨終板的厚度較薄,且軟骨細胞數(shù)目少。
(2)免疫組織化學(xué)檢測:TNF-α、IL-6蛋白的陽性表達主要在胞漿內(nèi),呈現(xiàn)棕褐色,淺棕黃色為弱陽性表達,無著色為陰性表達。與假手術(shù)組比較,模型組中TNF-α、 IL-6免疫組化陽性表達顯著增多,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與模型組比較,電針組、美
5、洛昔康組中TNF-α、IL-6的表達量明顯減少,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
(3) Western blot檢測:與假手術(shù)組比較,模型組中NF-κB p65、IKKβ蛋白的表達量明顯增加,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與模型組比較,電針組、美洛昔康組NF-κB p65、IKKβ蛋白的表達量明顯降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:(1)電針能夠有效的抑制大鼠退變椎間盤軟骨細胞中炎癥因子TN
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