艾葉化學(xué)成分的提取、分離與含量測(cè)定研究.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)艾葉中總黃酮成分進(jìn)行提取，并建立含量測(cè)定方法；以及對(duì)艾葉中的黃酮單體化合物及其他化學(xué)成分進(jìn)行提取、分離、結(jié)構(gòu)鑒定，為進(jìn)一步系統(tǒng)研究艾葉的化學(xué)成分及藥理毒理作用提供依據(jù)，為艾葉有效化學(xué)成分的大量提取制備和深入開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：本研究是在查閱大量相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，通過(guò)對(duì)文獻(xiàn)報(bào)道的艾葉化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行綜合分析后擬定實(shí)驗(yàn)方法。首先以乙醇浸漬法提取艾葉中的總黃酮成分，濃縮成浸膏。將浸膏進(jìn)行處理獲得預(yù)試

2、品，并制成溶液，用亞硝酸鈉和硝酸鋁顯色，于紫外分光光度計(jì)下測(cè)定吸光度值，進(jìn)而計(jì)算出艾葉樣品中總黃酮含量。對(duì)顯色劑的加入時(shí)間、溶液pH值等影響因素進(jìn)行分析，選擇最佳試驗(yàn)方法并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并對(duì)此方法進(jìn)行方法學(xué)考察，從而建立艾葉中總黃酮含量測(cè)定方法。然后再以不同極性的溶劑(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)對(duì)總黃酮浸膏進(jìn)行萃取分離。其中對(duì)艾葉的乙酸乙酯層萃取物分別采用硅膠柱層析，凝膠柱層析Sephadex LH-20，凝膠滲透柱色譜Toyopeal

3、 HW-40，制備薄層色譜以及制備高效液相色譜等方法進(jìn)行分離純化，得到單體化合物。運(yùn)用1H-NMR，13C-NMR和二維核磁共振等現(xiàn)代波譜技術(shù)對(duì)單體化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行綜合解析和鑒定。
　　 結(jié)果：通過(guò)影響因素和相關(guān)方法學(xué)考察，確定了艾葉中總黃酮含量測(cè)定方法，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線為：A=0.0118C+0.0133，r=0.9991，在5.800～58.000μg/ml范圍線性關(guān)系良好。該含量測(cè)定方法準(zhǔn)確度、精密度、重現(xiàn)性良好，且在30mi

4、n內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。同時(shí)，從艾葉的乙酸乙酯提取部位中共分離得到4個(gè)單體化合物，通過(guò)鑒定，其結(jié)構(gòu)分別為5，7，3’-三羥基-3，6，14’-三甲氧基黃酮醇(1)，5，7-二羥基-3，3’，6，4’-四甲氧基黃酮醇(2)，東莨菪內(nèi)酯(3)，對(duì)羥基苯甲醛(4)。其中化合物(1)和(2)為黃酮醇類化合物，化合物(3)為香豆素類，化合物(4)為芳香類小分子化合物。經(jīng)過(guò)文獻(xiàn)檢索，化合物(1)和(2)為首次從艾葉中分離得到。
　　 結(jié)論：本

5、研究利用亞硝酸鈉和硝酸鋁顯色原理，紫外分光光度法測(cè)定而建立了艾葉中總黃酮的含量測(cè)定方法，該方法簡(jiǎn)便快速、準(zhǔn)確穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。在此基礎(chǔ)上采用多種天然藥物化學(xué)提取分離方法，繼續(xù)對(duì)艾葉中總黃酮及其他化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，并利用現(xiàn)代波譜技術(shù)對(duì)所分離化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，最終確定4種單體化合物。對(duì)比文獻(xiàn)，本研究使用的方法更具有可操作性，與傳統(tǒng)的醇一水系統(tǒng)提取方法相比，更為準(zhǔn)確有效。本研究中所提取分離的化合物(1)和(2)為黃酮醇類化合物，且為首次從