福建尤溪金柑RAPD分析及柑桔類種質(zhì)資源的離體保存研究.pdf

1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文福建尤溪金柑RAPD分析及柑桔類種質(zhì)資源的離體保存研究姓名：董艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：果樹學(xué)指導(dǎo)教師：賴鐘雄20100401目始終最多；胡柚的葉片數(shù)目最少，但是由于蘇柑在保存lO個(gè)月后，葉片有脫落的現(xiàn)象，使得蘇柑在保存到第12個(gè)月時(shí)及之后成為葉片數(shù)目最少的一種?？傮w來看，蘆柑、桔類、甌柑的葉片比較多，金柑類和胡柚的葉片較少。對(duì)于主根長(zhǎng)，沙糖桔在保存過程中，主根始終最長(zhǎng)，蘆柑的主根長(zhǎng)僅次于沙糖桔；其余各材料在不同

2、階段根的生長(zhǎng)速度有所波動(dòng)；早熟金柑2號(hào)在保存2個(gè)月到18個(gè)月的時(shí)間里主根長(zhǎng)度始終最短?？傮w看，金柑類的主根長(zhǎng)度相比其他材料的短。從l8個(gè)月存活率分析，試管苗的葉片數(shù)目與主根長(zhǎng)度似乎與存活率沒有因果關(guān)系。保存最好的為早熟金柑l號(hào)、早熟金柑2號(hào)和胡柚，18個(gè)月的存活率分別為583％、616％、576％，其中蘇柑的存活率最差，在15個(gè)月時(shí)存活率僅為119％，18個(gè)月時(shí)僅為98％，看來MS培養(yǎng)基不適合蘇柑的保存。很多柑桔品種都能在MS培養(yǎng)基中、

3、不轉(zhuǎn)接不繼代的條件下保存很長(zhǎng)的時(shí)間。如保存至今的廣東陽春桔、福州血橙、福桔、重慶紅桔這4種材料的保存時(shí)間長(zhǎng)達(dá)51個(gè)月，其次為四季桔50個(gè)月，福壽桔49個(gè)月，而且這些柑桔試管苗仍有繼續(xù)保存下去的可能。3早熟金柑試管苗MnSOD基因克隆以常溫離體保存的早熟金柑試管苗幼嫩葉片為材料，獲得早熟金柑試管苗MnSOD基因eDNA全長(zhǎng)序列(全長(zhǎng)共1097bp)，并且在GenBank上登錄，登錄號(hào)為：GU2337441。該MnSODeDNA中5％／TR

4、為66bp，3UTR為347bp，3’端還含有13個(gè)poly(A)尾。與不同物種間MnSOD基因同源性比較，同源性都比較高。其開放閱讀框(Ol強(qiáng))共有684個(gè)堿基組成，編碼228個(gè)氨基酸，ATG為起始密碼子、T從為終止密碼子。蛋白理化性質(zhì)預(yù)測(cè)結(jié)果顯示：早熟金柑試管苗^鋤SDD蛋白的分子量是251597Da；理論等電點(diǎn)p1783；原子組成是：Cll40Hl，69N3030328S6，總原子數(shù)為3546；帶負(fù)電的氨基酸有20(As∥Glu)

5、，帶正點(diǎn)的氨基酸有2l(Arl；Lys)：該蛋白質(zhì)由20種氨基酸組成，其中Leu、Ala、Gly、Lys、Val、Ser含量較為豐富，分別為24(114％)、20(88％)、20(88％)、17(75％)、17(75％)、14(61％)，Cys含量最少，只有1(O4％)。二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)表明早熟金柑試管苗MnSOD蛋白由5132％的a螺旋、1404％的延伸鏈和3007％的不規(guī)則卷曲組成。縱觀蛋白的整體結(jié)構(gòu)，a螺旋和不規(guī)則卷曲是早熟金柑試管苗