瓠瓜種質(zhì)資源的RAPD和ISSR分析.pdf

1、瓠瓜(Lagenaria siceraria(Molina.)Standley)是一種重要的蔬菜，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的進(jìn)化和培育，中國(guó)的瓠瓜已形成了豐富品種資源，對(duì)瓠瓜種質(zhì)資源的遺傳多樣性研究，有利于其種質(zhì)資源的收集、保存，鑒定和合理利用。本研究采用RAPD和ISSR標(biāo)記相結(jié)合，運(yùn)用譜系聚類分析、主坐標(biāo)分析對(duì)38個(gè)瓠瓜品種之間的親緣關(guān)系及遺傳多樣性進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果如下： 1．在前人研究的基礎(chǔ)上，本研究結(jié)合瓠瓜特點(diǎn)，綜合考慮各種因素，

2、摸索出一套操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的高質(zhì)量瓠瓜DNA提取和純化技術(shù)。 2．在前人研究的基礎(chǔ)上，借鑒其它葫蘆科作物的研究成果，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和溫度梯度試驗(yàn)優(yōu)化RAPD和ISSR的擴(kuò)增程序，摸索出一套適合于分析瓠瓜種質(zhì)資源RAPD和ISSR反應(yīng)體系。 3．從200條RAPD隨機(jī)引物中篩選出20條具有明顯多態(tài)性的引物，對(duì)38份瓠瓜材料進(jìn)行分析，共擴(kuò)增出203條RAPD標(biāo)記帶，其中多態(tài)性條帶104條，多態(tài)性比率為51.2％；從40

3、條ISSR引物中篩選出12條能夠擴(kuò)增出清晰條帶的ISSR引物，共擴(kuò)增出115條ISSR標(biāo)記帶，其中多態(tài)性條帶96條，多態(tài)性比率為83.5％。 4．RAPD和ISSR分析的兩組相似系數(shù)之間的相關(guān)系數(shù)r=0.784，(n=703)，表明應(yīng)用這兩種技術(shù)對(duì)瓠瓜遺傳多樣性與親緣關(guān)系的分析具有較高的一致性和可信度，但這兩種聚類方法在個(gè)別品種分類上還存在一定的差異。 5．RAPD標(biāo)記聚類分析將供試的38份種質(zhì)可分為3個(gè)類群8組，主坐標(biāo)

4、分析將其分為3個(gè)類群13組；ISSR聚類分析將供試的38份種質(zhì)可分為5個(gè)類群8組，主坐標(biāo)分析將其分為4個(gè)類群10組。結(jié)果表明，應(yīng)用RAPD和ISSR標(biāo)記就足以對(duì)供試的材料進(jìn)行有效的類群劃分。 6．對(duì)供試瓠瓜材料RAPD結(jié)果進(jìn)行聚類分析，結(jié)果表明：品種間的遺傳相似系數(shù)在0.22～0.94；而依據(jù)ISSR分析結(jié)果品種間的遺傳相似系數(shù)為0.25～0.96。RAPD和ISSR分子標(biāo)記表現(xiàn)出與瓠瓜的農(nóng)藝性狀分類和地區(qū)分布有一定的相關(guān)性，揭