牛奶中基因組DNA提取方法的建立及中國荷斯坦奶牛兩個(gè)候選基因多態(tài)性研究.pdf

1、分類號(hào)密級(jí):華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文牛奶中基因組DNA提取方法的建立及中國荷斯坦奶牛兩個(gè)候選基因多態(tài)性研究ESTABLISHMENTOFEXTRACTIONDNAFROMMILKANDSTUDYONT丫VOCANDIDATEGENESPOLYMORPHISMINCHINESEHOLSTEIN張軍偉易建明教授生師究研導(dǎo)專業(yè):動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究方向:動(dòng)物分子生物育種獲得學(xué)位名稱:農(nóng)學(xué)碩士獲得學(xué)位時(shí)間:2009年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)

2、院與動(dòng)物醫(yī)學(xué)院二00九年六月牛奶中基因組DNA提取方法的建立及中國荷斯坦奶牛兩個(gè)候選基因多態(tài)性研究2.1.1從牛奶中提取基因組DNA常規(guī)法建立....................................……222.1.2從牛奶中提取基因組DNA試劑盒法建立..........................……，..…232.1.3從牛血液中提取基因組DNA的方法...............................

3、.........……242.2基因組DNA質(zhì)量和濃度的檢測(cè)..........................................................……242.3牛奶中提取基因組DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)和PCR檢測(cè)............……243結(jié)果與分析.............................................................................

4、.........................……253.1常規(guī)方法提取DNA肉眼觀察結(jié)果......................................................……253.2紫外分光廣度計(jì)檢測(cè)DNA純度和濃度........................……、...............……253.3DNA含量和體細(xì)胞數(shù)之間的回歸關(guān)系.............................

5、...................……263.4從奶樣和血樣中提取基因組DNA效果比較和PCR檢測(cè)、...............……274討論...........................................……，................................................................……295小結(jié).............................

6、.....................................................................................……29第三章丑召ZNIAI和月店月IB基因SNP位點(diǎn)與產(chǎn)奶性狀的關(guān)聯(lián)分析.................……301材料與方法...........……，.........................................................

7、...........................……301.1主要儀器.……，.......................................................……，...……，....……，......……301.2主要試劑及其配置..................................................……301.3基因組DNA的提取.，..................

8、...................……301.4PCR引物設(shè)計(jì)合成、反應(yīng)體系、反應(yīng)程序、產(chǎn)物檢測(cè)和PCR一RFLP.…301.4.1PCR引物設(shè)計(jì)合成.......................................................................……301.4.1.1BB丁N了Al基因....................................................

9、.........……301.4.1.2月rs乃盆IB基因.......................................................……311.4.2PcR反應(yīng)體系..........................................................……311.4.2.IBB廠配IAI基因........................................……

10、311.4.2.2HSPAIB基因.....................................................……犯1.4.3PcR反應(yīng)程序...……，.....................................，……321.4.3.1BBTNIAI基因........................................……犯1.4.3.2H醚刊IB基因.……，..........

11、.............................................……321.4.4PcR產(chǎn)物檢測(cè).................................................……321.4.5PcR一RFLP分析.................................................……犯1.5PCR產(chǎn)物的克隆回收測(cè)序........................

12、.............................................……331.6測(cè)序.........................................................................................................……341.7分子生物學(xué)軟件和數(shù)據(jù)分析軟件........................................

13、.................……341.8分子標(biāo)記位點(diǎn)的統(tǒng)計(jì)分析方法.............................................................……341.8.1基因頻率和基因型頻率的計(jì)算...................................................……341.8.2有效等位基因數(shù)(Effectivenumberofaleles，Ne).....

14、..........……341.8.3群體純合度和雜合度(Ho和He)...........................................……351.8.4HardyWeinberg平衡檢測(cè)....................................................……，.……351.9數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法......................................……351.9

15、.1場、年、季、胎次的確定...........................................................……351.9.2產(chǎn)奶量的校正...............................................……351.9.3分子標(biāo)記位點(diǎn)與荷斯坦牛產(chǎn)奶性能關(guān)系的數(shù)學(xué)模型...............……362結(jié)果與分析..............................