草間鉆頭蛛（Hylyphantes graminicola）的細胞遺傳及方法學的研究.pdf

1、本文報道了草間鉆頭蛛Hylyphantes graminicola的細胞遺傳學及其研究方法。針對微小型蜘蛛染色體制片方法與技術(shù)進行了改進和提高，首創(chuàng)了改良針涂片法，即：有絲分裂用3-7d的胚胎細胞為核型分析材料，減數(shù)分裂用成熟不久的蜘蛛性腺為材料。將活蛛在25℃下饑餓斷水2-3d，用海綿或吸水紙吸附0.01％秋水仙素水溶液喂養(yǎng)5d后，經(jīng)乙醚麻醉，放入盛有專用生理鹽水黑紙背景的小蠟皿中，鏡下取出組織，轉(zhuǎn)入潔凈玻片，標記區(qū)域后，用硬針尖搗碎

2、(無須離心)，性腺細胞低滲10-15min，胚胎細胞低滲20-30min，用三種梯度比例冰醋酸：甲醇液分別固定10-15s不等，倒去固定液，潮濕空氣中干燥2h，用改良酚紅或吉姆薩液染色30min左右，再倒去染液，蓋上蓋玻片，用橡皮輕敲數(shù)下，鏡檢、攝像、計數(shù)和適當處理；SC<,s>(聯(lián)．會復(fù)合體)用硝酸銀液染色，N-帶、C-帶顯示用相應(yīng)方法進行處理，獲取完整的細胞遺傳表征信息： (1)通過對草間鉆頭蛛的胚胎細胞有絲分裂的研究和分析

3、，結(jié)果顯示，草間鉆頭蛛的體細胞核型有2種，雌雄性個體染色體數(shù)目不一樣，雌性( )2n=26，雄性( )2n=24，染色體大都為端著絲粒染色體和近端著絲粒染色體，少數(shù)染色體上有明顯的次縊痕區(qū)域，C-帶顯示的異染色質(zhì)情況不十分穩(wěn)定。性決定類型為X<,1>X<,2>O，雌性( )2n=26(22+X<,1>X<,1>X<,2>X<,2>)，雄性( )2n=24(22+X<,1>X<,2>)，雌性比雄性多2條X染色體，性染色體均等長。總之，草間

4、鉆頭蛛胚胎細胞染色體多態(tài)現(xiàn)象明顯；另外，胚胎細胞中偶見單倍體、單倍二倍體和多倍體混倍現(xiàn)象，以及散失的B染色體。 (2)通過觀察草間鉆頭蛛精巢玻片，減數(shù)分裂I前期的細線期不明顯；雖然每條染色體已經(jīng)復(fù)制，但看不到兩條染色體單體；偶線期染色體形態(tài)上與細線期差別不大，同源染色體開始配對；粗線期問出現(xiàn)少量交叉，染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu)與偶線期不同，染色體變粗變短；無明顯雙線期和終變期，偶有著絲粒端化現(xiàn)象；其性腺細胞染色體數(shù)目顯示，卵細胞n=13，