農(nóng)桿菌介導(dǎo)的草坪草遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文 摘要摘 要本實驗以高羊茅和多年生黑麥草成熟種子為材料，研究了影響其植株再生的若干因素，建立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化體系。獲得的主要研究結(jié)果如下：1 不同生長激素種類和濃度的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，對多年生黑麥草和高羊茅的組織培養(yǎng)產(chǎn)生不同影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，d i c a m b a 作為生長激素的效果要好于2 ，4D ；以2 ，4 一D 為生長激素時，在9m gl 。1 的濃度范圍內(nèi)，隨著2 ，4 一D 濃度的增加，植株再生率呈上升

2、的趨勢；在5m g l 。d i c a m b a 和5m g 1 ’1 2 ，4 一D 的處理中加入1 m g l ’1 N 從對植株再生率的影響不大。2 低濃度的6 - B A ( O ．1m g 1 。) 可以提高高羊茅的植株再生率，而高濃度的6 ．B A 顯著抑制愈傷組織的產(chǎn)生，而使高羊茅植株的再生率降低。3 在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中加入2 m g l 。A B A 顯著抑制芽的生長和愈傷組織的產(chǎn)生，對高羊茅的植株再生產(chǎn)生負(fù)面影響。4

3、比較了三種基本培養(yǎng)基有機(jī)營養(yǎng)成分對高羊茅組織培養(yǎng)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，B 5 有機(jī)營養(yǎng)成分效果最佳，M 8 有機(jī)營養(yǎng)成分次之，而M s 有機(jī)營養(yǎng)成分效果最差。5 低濃度的脯氨酸、谷氨酰胺和水解酪蛋白( 1 0 0 m g 1 ’1 ) 有利于提高高羊茅的植株再生率，而高濃度則起反作用。6 在多年生黑麥草的組織培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)，蔗糖代替麥芽糖作為碳源，有利于提高多年生黑麥草的植株再生率。7 在遺傳轉(zhuǎn)化中發(fā)現(xiàn)，在分化培養(yǎng)基中加入5 0m g1 4 的

4、潮霉素，可以提高對轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選效率。8 建立了多年生黑麥草和高羊茅的遺傳轉(zhuǎn)化體系，通過這套體系獲得了4 6 株多年生黑麥草和7 株高羊茅的再生植株，其中6 株多年生黑麥草和1 株高羊茅為P C R陽性。浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文 摘要h i 曲e rs e I e c t i o n f 把q u e n c y ．8 ．A n 4 9 加6 d c 據(jù)，f “m ，“m 岜向c f P ，蝠·m e d i a t e d g

5、e n c t i c 訂a n s f o r n l a t i o n s y s t e m f o r凡J ，甜c 口口r “胛擁口c P d a n d 三D ““研p 8 ，零肝“ Pw a se s t a b l i s h e d ．4 6 三D ，f “，”p F ，℃胛n P a n d7，缸m c 口d r 塒成聆口c P d p l a l l t s 、Ⅳc r cr e g e n e r a t e d