ATRA對(duì)腎小球硬化大鼠腎小球TRPC6表達(dá)的影響.pdf

1、目的:通過(guò)檢測(cè)全反式維甲酸（ATRA）干預(yù)前后腎小球硬化(GS)大鼠腎小球瞬時(shí)受體電位陽(yáng)離子通道蛋白6(TRPC6)的表達(dá)變化，探討ATRA對(duì)腎小球TRPC6的影響。
　　方法:采用健康8周齡SPF級(jí)雄性Wistar大鼠（體重180士20g），隨機(jī)分為3組，假手術(shù)組(SHO)、模型組(GS)和治療組（ATRA），每組20只。采用左側(cè)腎切除加1周后尾靜脈注射阿霉素(5mg/kg)的方法建立大鼠腎小球硬化(GS)模型。術(shù)前1天，ATR

2、A組開(kāi)始給予ATRA灌胃(15mg/kg)，模型組和假手術(shù)組給予等量生理鹽水灌胃，每天1次，共12周，于造模12周末處死大鼠。腎臟病理切片采用蘇木精-伊紅染色（HE）和高碘酸-希夫氏染色(PAS)觀察腎臟的形態(tài)學(xué)變化，PAS染色計(jì)算腎小球硬化指數(shù)(GSI)，電鏡下觀察足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)變化。檢測(cè)大鼠造模前后的尿蛋白含量，以及血肌酐、尿素氮的含量。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎小球TRPC6、TGF-β1和Ⅳ型膠原蛋白(Col-Ⅳ)的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄

3、-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測(cè)腎小球TRPC6 mRNA的表達(dá)，免疫印跡法(WB)檢測(cè)腎小球TRPC6的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.與SHO組比較，GS組大鼠PAS染色顯示腎小球局灶節(jié)段性硬化，電鏡下腎小球足細(xì)胞足突彌漫性融合、消失，GSI指數(shù)、尿蛋白含量及血肌酐、尿素氮含量均顯著升高，提示阿霉素致GS大鼠模型成功建立;
　　2.與GS組比較，ATRA組PAS染色顯示大鼠腎小球硬化程度明顯減輕，電鏡下腎小球足

4、突融合、消失的程度明顯減輕，GSI指數(shù)、尿蛋白含量、血肌酐、尿素氮含量及均顯著降低;
　　3.與SHO組比較，GS組腎小球TGF-β1、Col-Ⅳ和TRPC6的蛋白表達(dá)均顯著升高，TRPC6的mRNA表達(dá)顯著升高;
　　4.與GS組比較，ATRA組大鼠腎小球TGF-β1、Col-Ⅳ和TRPC6的蛋白表達(dá)均顯著下降，TRPC6的mRNA表達(dá)顯著下降;
　　5.相關(guān)性分析:腎小球TRPC6的蛋白表達(dá)與GSI指數(shù)、TGF-β