
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文檔簡介
1、目的:探究食醋對小鼠腸道細(xì)菌16SrDNA表達(dá)量的變化影響,并使用硫酸葡聚糖(DSS)誘導(dǎo) C57BL/6小鼠制備炎癥性腸病模型,檢測相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)量的變化,探究食醋對腸道的保護(hù)作用及對炎癥性腸病的抵御作用。
方法:將24只 C57BL/6小鼠隨機(jī)3組,分別標(biāo)記為模型組、食醋組和對照組。對照組和模型組小鼠自由飲用蒸餾水28天后,對照組繼續(xù)飲用蒸餾水,模型組自由飲用3%DSS溶液;食醋組自由飲用食醋溶液28天后,給予3%DSS
2、溶液。在第0、7、14、21和28天收集食醋組與對照組小鼠的糞便,提取糞便細(xì)菌總 DNA。采用熒光定量 PCR鑒定雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、腸球菌屬、梭菌屬以及脫硫弧菌屬的16SrDNA表達(dá)變化。在造模成功后,處死小鼠,取小鼠結(jié)腸中段,提取腸組織總 RNA并反轉(zhuǎn)錄為 cDNA,檢測 IL-10、IL-17A、IL-17F及IL-23的相對表達(dá)量變化。
結(jié)果:乳桿菌屬16SrDNA表達(dá)量是5類待測菌屬的表達(dá)量是最高的。與對照組相比較
3、,在不同時間點(diǎn)乳桿菌屬的16SrDNA表達(dá)量有變化,雙歧桿菌屬的16SrDNA表達(dá)在實(shí)驗(yàn)組中有明顯的升高。但雙岐桿菌屬和乳酸菌屬兩種益生菌屬的16SrDNA含量在5種檢測菌屬中的比例維持在92.61%-99.09%。第28天時,梭菌屬與腸球菌屬在實(shí)驗(yàn)組中的16SrDNA表達(dá)量明顯低于對照組。腸球菌屬、脫硫弧桿菌屬和梭菌屬3種有害菌屬的16SrDNA水平僅占5種菌屬16SrDNA表達(dá)量0.91%-7.32%。通過 DSS誘導(dǎo)形成炎癥性腸病
4、模型后,檢測細(xì)胞因子相對表達(dá)量,分析發(fā)現(xiàn) IL-10的相對表達(dá)量在模型組中略低于食醋組和對照組,對照組的相對表達(dá)量稍高于食醋組,模型組、食醋組和對照組三者的相對表達(dá)量呈上升趨勢,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。IL-17A在 DSS組中的相對表達(dá)量略高于食醋組,但兩組表達(dá)量均明顯低于對照組,但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。食醋組中 IL-17F相對表達(dá)量明顯低于對照組和模型組,模型組的表達(dá)量約為實(shí)驗(yàn)組的5倍(P<0.01),具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。食醋組小鼠與僅飲用
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