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文檔簡介
1、目的:研究痹腫消湯(Bizhongxiao decoction,BZXD)有效成分之一芹菜素(Apigenin,AP)對小鼠體外活化T細胞活化、增殖及細胞因子基因表達的影響,探討其在免疫抑制及治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)方面的作用機制。 方法:無菌制備小鼠脾臟T淋巴細胞,加入不同濃度的AP(0、20、40、80、120、160μmol/L)并用佛波醇酯(Phorbol-12-myrista
2、tel3-acetate,PMA)和離子霉素(Ionomycin,Ion)刺激T細胞活化、增殖;48 h后用MTT法檢測T細胞增殖情況;6h后用RT-PCR法檢測T細胞白細胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)mRNA、干擾素-γ(Interferon gamma,IFN-γ)mRNA及IL-4mRNA的表達情況。 結(jié)果: 1.48h后,PMA+Ion組細胞MTT吸光度(Absorbance,A值)明顯高于未
3、刺激組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。40、80、120、160μmol/L濃度的AP組各A值均較PMA+Ion組減弱,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。AP濃度(0、20、40、80、120、160μmol/L)與A值呈顯著負相關(guān)(r=0.855,P<0.01)。 2.6h后,PMA+Ion組細胞IL-2mRNA,IFN-γmRNA及IL-4mRNA的表達均較空白對照組增高,差異具有顯著性(P<0.01)。40、80、
4、120μmol/L濃度的AP組上述各細胞因子的基因表達較PMA+Ion組明顯降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),且呈不同程度的抑制。20μmol/L濃度的AP組的IFN-γmRNA及IL-4mRNA的表達較PMA+Ion組表達明顯減弱,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),但在IL-2mRNA的表達上無明顯差異(P>0.05)。AP的實驗濃度與上述各細胞因子的表達均呈顯著負相關(guān)(IL-2mRNA: r=-0.965,P<0.01;I
5、FN-γmRNA: r=-0.944,P<0.01; IL-4mRNA: r=-0.964,P<0.01)。各實驗濃度AP對PMA+Ion誘導(dǎo)活化的小鼠T淋巴細胞IFN-γmRNA表達的抑制作用強于IL-4mRNA的抑制(P<0.01)。 結(jié)論: 1.AP能明顯抑制對PMA+Ion活化誘導(dǎo)的小鼠T淋巴細胞增殖,提示AP具有免疫抑制作用。 2.AP對PMA+Ion活化誘導(dǎo)的小鼠T淋巴細胞IL-2mRNA、IFN-γ
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