中藥接骨I號(hào)超聲透入對(duì)骨折愈合過(guò)程中BMP-7表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:建立新西蘭大白兔雙側(cè)橈骨中段骨折的動(dòng)物模型,觀察中藥超聲透入療法治療橈骨骨折的療效及中藥超聲透入對(duì)骨折愈合過(guò)程中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7表達(dá)的影響。
　　 方法:構(gòu)建84只健康新西蘭大白兔雙側(cè)橈骨中段3.0 mm骨缺損的骨折模型,建模成功后將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成3組(實(shí)驗(yàn)組、超聲組、對(duì)照組,每組各28只);實(shí)驗(yàn)組以含接骨Ⅰ號(hào)(主要成分為:紅花、桃紅、桂枝、川芎、乳香、沒(méi)藥、元胡、鍛自然銅、續(xù)斷、狗脊等)的自制中藥超聲耦合劑行中藥低強(qiáng)

2、度脈沖超聲透入治療;超聲組每日于骨折部位以普通超聲耦合劑(不含接骨Ⅰ號(hào))行低強(qiáng)度脈沖超聲治療;對(duì)照組予以無(wú)超聲信號(hào)輸出的超聲探頭行假刺激治療。分別于術(shù)后3、6、9、12、15天取骨折局部組織行RT-PCR和免疫組織化學(xué)檢測(cè),分別從基因和蛋白水平了解各組骨折局部BMP-7的表達(dá)差異。術(shù)后4、6周經(jīng)耳緣靜脈麻醉后行X線檢查以觀察不同治療方法對(duì)骨折愈合的療效差異,然后處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以骨折部位為中心截取2.0 cm長(zhǎng)橈骨標(biāo)本制作石蠟組織切片,行H

3、E染色,從組織學(xué)角度進(jìn)一步了解骨折的愈合情況。
　　 結(jié)果: X線片檢查顯示實(shí)驗(yàn)組骨折愈合快于超聲組及對(duì)照組,超聲組骨折愈合快于對(duì)照組。HE切片所見(jiàn)骨折愈合情況與X線片觀察結(jié)果一致。RT-PCR提示:術(shù)后3天,BMP-7灰度值/內(nèi)參β-actin灰度值在實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組(P＜0.05);術(shù)后6、9、12天BMP-7 mRNA表達(dá)逐漸增強(qiáng),實(shí)驗(yàn)組均高于超聲組及對(duì)照組(P＜0.05),其中在術(shù)后6、9、12天實(shí)驗(yàn)組BMP-7表達(dá)與對(duì)

4、照組差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)、術(shù)后12天實(shí)驗(yàn)組與超聲組表達(dá)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);術(shù)后15天對(duì)照組呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。免疫組織化學(xué)結(jié)果提示:術(shù)后3天起各組BMP-7表達(dá)水平逐漸增強(qiáng),實(shí)驗(yàn)組于術(shù)后15天呈現(xiàn)下降趨勢(shì);術(shù)后3天,實(shí)驗(yàn)組BMP-7表達(dá)強(qiáng)于對(duì)照組(P＜0.05);術(shù)后第6、9、12、15天實(shí)驗(yàn)組均強(qiáng)于超聲組及對(duì)照組(P＜0.05),其中術(shù)后9、12天實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組表達(dá)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)